-
பிசிஆர், மல்டிபிள் பிசிஆர், இன் சிட்டு பிசிஆர், ரிவர்ஸ் பிசிஆர், ஆர்டி-பிசிஆர், qPCR (1)– PCR
PCR, மல்டிபிள் பிசிஆர், இன் சிட்டு பிசிஆர், ரிவர்ஸ் பிசிஆர், ஆர்டி-பிசிஆர், qPCR(1)– PCR பல்வேறு PCR களின் கருத்துகள், படிகள் மற்றும் விவரங்களை வரிசைப்படுத்துவோம்.PCR பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை, PCR என குறிப்பிடப்படுகிறது, இது ஒரு மூலக்கூறு உயிரியல் தொழில்நுட்பமாகும், இது குறிப்பிட்ட DNA துண்டுகளை பெரிதாக்க பயன்படுகிறது.இது ஒரு ...மேலும் படிக்கவும் -
qRT-PCR சோதனைக் கொள்கை
RT-qPCR சாதாரண PCR தொழில்நுட்பத்திலிருந்து உருவாக்கப்பட்டது.இது பாரம்பரிய PCR எதிர்வினை அமைப்பில் ஒளிரும் இரசாயனங்கள் (ஃப்ளோரசன்ட் சாயங்கள் அல்லது ஃப்ளோரசன்ட் ஆய்வுகள்) சேர்க்கிறது, மேலும் பிசிஆர் அனீலிங் மற்றும் நீட்டிப்பு செயல்முறையை அவற்றின் வெவ்வேறு ஒளிரும் வழிமுறைகளுக்கு ஏற்ப உண்மையான நேரத்தில் கண்டறிகிறது.ஃப்ளோரசன்ட் சிக்னா...மேலும் படிக்கவும் -
RT-PCR சோதனை எதிர்வினை அமைப்பு மேம்படுத்தல் முறை விரிவான சுருக்கம்
Ⅰஎதிர்வினை அமைப்பின் உணர்திறனை அதிகரிக்கவும்: 1. தனி உயர்தர ஆர்என்ஏ: வெற்றிகரமான சிடிஎன்ஏ தொகுப்பு உயர்தர ஆர்என்ஏவில் இருந்து வருகிறது.உயர்தர RNA ஆனது குறைந்தபட்சம் ஒரு மொத்த நீளத்தையாவது உறுதிசெய்ய வேண்டும் மற்றும் EDTA அல்லது SDS போன்ற ரெக்கார்டிங் என்சைம்களைக் கொண்டிருக்காத தடுப்பான்களைக் கொண்டிருக்கவில்லை.தரமான...மேலும் படிக்கவும் -
qPCR சோதனைகளுக்கான நியாயமான Ct மதிப்புகளின் வரம்பை எவ்வாறு உறுதிப்படுத்துவது
Ct மதிப்பு என்பது ஃப்ளோரசன்ட் அளவு PCR இன் மிக முக்கியமான முடிவு விளக்க வடிவமாகும்.இது மரபணு வெளிப்பாடு வேறுபாடுகள் அல்லது மரபணு நகல் எண்ணைக் கணக்கிடப் பயன்படுகிறது.எனவே ஃப்ளோரசன்ஸ் அளவீட்டின் Ct மதிப்பு என்ன நியாயமானதாகக் கருதப்படுகிறது?Ct மதிப்பின் பயனுள்ள வரம்பை எவ்வாறு உறுதி செய்வது?Ct என்றால் என்ன...மேலும் படிக்கவும் -
உங்கள் RT-qPCR பரிசோதனையின் வெற்றி விகிதத்தை இரட்டிப்பாக்க, பின்வரும் விவரங்களுக்கு கவனம் செலுத்துங்கள்!
RT-qPCR என்பது மூலக்கூறு உயிரியலின் அடிப்படை பரிசோதனையாகும், மேலும் அனைவரும் அதை நன்கு அறிந்திருக்க வேண்டும்.இது முக்கியமாக மூன்று படிகளை உள்ளடக்கியது: ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தல், சிடிஎன்ஏவில் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் மற்றும் நிகழ்நேர ஃப்ளோரசன்ட் அளவு PCR.இது உதவாது, என்ன நடக்கிறது?இதில் ஏதாவது பிரச்சனை இருக்கலாம்...மேலும் படிக்கவும் -
RNA பிரித்தெடுத்தல், குறிப்பாக 260/230 குறைவாக உள்ளது, மேலும் pcr இயக்கத்தின் ct மதிப்பு மிக அதிகமாக உள்ளது.அதை எப்படி தீர்ப்பது?
A260/A230 இன் குறைந்த விகிதம் பொதுவாக 230nm இல் அதிகபட்ச உறிஞ்சுதல் அலைநீளத்துடன் கூடிய அசுத்தங்களால் ஏற்படுகிறது.இந்த அசுத்தங்கள் என்ன என்பதை பார்ப்போம்: பொதுவான மாசுபடுத்திகள் உறிஞ்சுதல் அலைநீள விகித விளைவு புரதம் ~230nm மற்றும் 280nm ஒரே நேரத்தில் A 260 /A 280 மற்றும் A 260 /A குறைப்பு ...மேலும் படிக்கவும் -
ஃப்ளோரசன்ட் அளவு PCR (qPCR) - ப்ரைமர் வடிவமைப்பு
qPCR சோதனைகளில், ப்ரைமர் வடிவமைப்பும் மிக முக்கியமான இணைப்பாகும்.ப்ரைமர்கள் பொருத்தமானதா இல்லையா என்பது, பெருக்க திறன் தரநிலையை அடைகிறதா, பெருக்கப்பட்ட தயாரிப்புகள் குறிப்பிட்டதா, மற்றும் சோதனை முடிவுகள் கிடைக்குமா என்பவற்றுடன் நெருங்கிய தொடர்புடையது.எனவே எப்படி செய்வது...மேலும் படிக்கவும் -
PCR எதிர்வினைகள் மற்றும் அவற்றின் செயல்பாடுகளில் பொதுவான சேர்க்கைகள்
PCR வினைகளைச் செய்யும்போது ஒவ்வொருவரும் எப்பொழுதும் இதுபோன்ற அல்லது இதுபோன்ற பிரச்சனைகளை எதிர்கொள்வார்கள் என்று நான் நம்புகிறேன், ஆனால் அவற்றில் பெரும்பாலானவை இரண்டு முக்கிய பிரச்சனைகளாக வகைப்படுத்தலாம்: மரபணு டெம்ப்ளேட்டின் மிகக் குறைந்த பெருக்கம் (பெருக்கம்);அதிக இலக்கு அல்லாத மரபணு பெருக்கம்.சேர்க்கைகளைப் பயன்படுத்துவது பொதுவான ஸ்ட்ராக்களில் ஒன்றாகும்.மேலும் படிக்கவும் -
உலகம் முழுவதும் சந்தைப்படுத்தப்பட்ட 45 மரபணு சிகிச்சை மருந்துகளின் சுருக்கம்
மரபணுக்கள் பண்புகளை கட்டுப்படுத்தும் அடிப்படை மரபணு அலகுகள்.சில வைரஸ்களின் மரபணுக்கள், ஆர்என்ஏவால் ஆனவை தவிர, பெரும்பாலான உயிரினங்களின் மரபணுக்கள் டிஎன்ஏவால் ஆனவை.உயிரினங்களின் பெரும்பாலான நோய்கள் மரபணுக்களுக்கும் சுற்றுச்சூழலுக்கும் இடையிலான தொடர்புகளால் ஏற்படுகின்றன.மரபணு சிகிச்சை அடிப்படையில் நோயை குணப்படுத்தும்...மேலும் படிக்கவும் -
ஆர்என்ஏ சிகிச்சையின் சகாப்தத்தில், யார் தொழில்துறையின் "புதிய அன்பாக" ஆக முடியும் |ஆண்டு சரக்கு
ஆதாரம்: WuXi AppTec சமீபத்திய ஆண்டுகளில், RNA சிகிச்சையின் துறையானது ஒரு வெடிப்புப் போக்கைக் காட்டியுள்ளது- கடந்த 5 ஆண்டுகளில் மட்டும், 11 RNA சிகிச்சைகள் FDA ஆல் அங்கீகரிக்கப்பட்டுள்ளன, மேலும் இந்த எண்ணிக்கை முன்னர் அங்கீகரிக்கப்பட்ட RNA சிகிச்சைகளின் தொகையை விட அதிகமாகும்!பாரம்பரிய சிகிச்சை முறைகளுடன் ஒப்பிடும்போது, ஆர்.என்.ஏ.மேலும் படிக்கவும் -
நியூக்ளிக் அமிலம் எடுக்கப்பட்டது!ஆனால் இந்த DNA (RNA) நீங்கள் கற்பனை செய்த DNA (RNA) தானா?
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் பற்றி உங்களுக்கு எவ்வளவு தெரியும்? சுத்திகரிக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலத்தின் ஆரம்பம் மற்றும் முடிவு ஆரம்பத்தில் எல்லாம் கடினம், சுத்திகரிக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலம் மூலக்கூறு சோதனைகளில் மிகவும் துவக்கம், அடுத்தடுத்த சோதனைகளில் வெற்றி அல்லது தோல்வி ஒரு முக்கியமான தாக்கத்தை ஏற்படுத்துகிறது.ட்ரேஸ்/அல்ட்ரா-ட்ரேஸ் UV...மேலும் படிக்கவும் -
7 நிமிடம்: 96-கிணறு தட்டு செல் முதல் RT-qPCR வரை
7 நிமிடங்கள் எவ்வளவு நேரம்?இது 420 வினாடிகள்.7 நிமிடங்களில் நான் என்ன செய்ய முடியும்?இது ஒரு கோப்பை தேநீர், ஒரு பாடலைக் கேட்பது;இது வகுப்பில் கடந்து செல்வதில் மகிழ்ச்சி, ஆனால் திரைச்சீலை விலகும் முன் கவலை....மேலும் படிக்கவும்