1. 5 க்கும் மேற்பட்ட ஆர்என்ஏக்களின் செயல்பாடுகளை குறிப்பிடவும்?
பரிமாற்ற ஆர்என்ஏ டிஆர்என்ஏ பரிமாற்ற அமினோ அமிலம் ரைபோசோம் ஆர்என்ஏ ஆர்ஆர்என்ஏ ரைபோசோம் மெசஞ்சர் ஆர்என்ஏ எம்ஆர்என்ஏ புரோட்டீன் தொகுப்பு டெம்ப்ளேட் பன்முக அணுக்கரு ஆர்என்ஏ hnRNA முதிர்ந்த எம்ஆர்என்ஏவின் முன்னோடி சிறிய அணுக்கரு ஆர்என்ஏ snRNA சிறிய சைட்டோபிளாஸ்மிக் சிக்னல் ரீஆர்என்ஏ மற்றும் பிஆர்என்ஏ ஸ்பிளிசிங்கில் ஈடுபட்டுள்ளது. அறிவாற்றல் உடல் கூறுகள் Antisense RNA anRNA/micRNA மரபணு வெளிப்பாட்டைக் கட்டுப்படுத்துகிறது Ribozyme RNA என்சைமடிக் செயலில் உள்ள RNA
2. புரோகாரியோடிக் மற்றும் யூகாரியோடிக் ஊக்குவிப்பாளர்களுக்கு இடையே உள்ள முக்கிய வேறுபாடு என்ன?
புரோகாரியோடிக் TTGACA --- TATAAT------இனிஷியேஷன் தளம்-35 -10 யூகாரியோடிக் மேம்படுத்தி---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-Initiation Site-110 -70 -25
3. இயற்கை பிளாஸ்மிட்களின் செயற்கை கட்டுமானத்தின் முக்கிய அம்சங்கள் யாவை?
இயற்கை பிளாஸ்மிட்கள் பெரும்பாலும் குறைபாடுகளைக் கொண்டிருக்கின்றன, எனவே அவை மரபியல் பொறியியலுக்கான கேரியர்களாகப் பயன்படுத்த ஏற்றதாக இல்லை, மேலும் அவை மாற்றியமைக்கப்பட்டு கட்டமைக்கப்பட வேண்டும்: a.பொதுவாக ஆண்டிபயாடிக் மரபணுக்கள், தேர்வுக்கு பயன்படுத்த எளிதான இரண்டு அல்லது அதற்கு மேற்பட்டவை போன்ற பொருத்தமான தேர்வு மார்க்கர் மரபணுக்களைச் சேர்க்கவும்.பி.மறுசீரமைப்பை எளிதாக்குவதற்கு பொருத்தமான என்சைம் வெட்டும் தளங்களை அதிகரிக்கவும் அல்லது குறைக்கவும்.c.நீளத்தை சுருக்கவும், தேவையற்ற துண்டுகளை துண்டிக்கவும், இறக்குமதி செயல்திறனை மேம்படுத்தவும் மற்றும் ஏற்றுதல் திறனை அதிகரிக்கவும்.ஈ.நகலை இறுக்கமாக இருந்து தளர்வாகவும், குறைவான பிரதிகளில் இருந்து அதிக நகல்களாகவும் மாற்றவும்.இ.மரபணு பொறியியலின் சிறப்பு தேவைகளுக்கு ஏற்ப சிறப்பு மரபணு கூறுகளைச் சேர்க்கவும்
4. திசு-குறிப்பிட்ட சிடிஎன்ஏவின் வேறுபட்ட திரையிடலுக்கான ஒரு முறையின் உதாரணத்தைக் கொடுங்கள்?
இரண்டு செல் மக்கள்தொகைகள் தயாரிக்கப்படுகின்றன, இலக்கு மரபணு உயிரணுக்களில் ஒன்றில் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது அல்லது அதிகமாக வெளிப்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் இலக்கு மரபணு மற்ற செல்லில் வெளிப்படுத்தப்படவில்லை அல்லது குறைவாக வெளிப்படுத்தப்படுகிறது, பின்னர் இலக்கு மரபணு கலப்பினம் மற்றும் ஒப்பீடு மூலம் கண்டறியப்படுகிறது.எடுத்துக்காட்டாக, கட்டிகளின் நிகழ்வு மற்றும் வளர்ச்சியின் போது, ​​​​கட்டி செல்கள் சாதாரண செல்களை விட வெவ்வேறு வெளிப்பாடு நிலைகளுடன் mRNA களை வழங்கும்.எனவே, கட்டி தொடர்பான மரபணுக்களை வேறுபட்ட கலப்பினத்தால் திரையிடலாம்.தூண்டல் முறையானது, வெளிப்பாட்டைத் தூண்டும் மரபணுக்களைத் திரையிடவும் பயன்படுத்தப்படலாம்.
5. ஹைப்ரிடோமா செல் கோடுகளின் உருவாக்கம் மற்றும் திரையிடல்?
மண்ணீரல் B செல்கள் + மைலோமா செல்கள், செல் இணைவை ஊக்குவிக்க பாலிஎதிலீன் கிளைகோலை (PEG) சேர்க்கின்றன, மேலும் HAT ஊடகத்தில் வளர்க்கப்படும் ப்ளெனிக் B-மைலோமா இணைவு செல்கள் (ஹைபோக்சாந்தைன், அமினோப்டெரின், T) தொடர்ந்து ஊட்டமளிக்கின்றன.செல் இணைவு கொண்டுள்ளது: மண்ணீரல்-மண்ணீரல் இணைவு செல்கள்: வளர முடியவில்லை, மண்ணீரல் செல்களை விட்ரோவில் வளர்க்க முடியாது.எலும்பு-எலும்பு இணைவு செல்கள்: ஹைபோக்சாந்தைனைப் பயன்படுத்த முடியாது, ஆனால் ஃபோலேட் ரிடக்டேஸைப் பயன்படுத்தி இரண்டாவது பாதை வழியாக பியூரினை ஒருங்கிணைக்க முடியும்.அமினோப்டெரின் ஃபோலேட் ரிடக்டேஸைத் தடுக்கிறது, இதனால் வளர முடியாது.எலும்பு-மண்ணீரல் இணைவு செல்கள்: HAT இல் வளரலாம், மண்ணீரல் செல்கள் ஹைபோக்சாந்தைனைப் பயன்படுத்தலாம், மற்றும் எலும்பு செல்கள் செல் பிரிவு செயல்பாட்டை வழங்குகின்றன.
6. டிடாக்சி டெர்மினல் டெர்மினேஷன் முறை (சாங்கர் முறை) மூலம் டிஎன்ஏவின் முதன்மை கட்டமைப்பை தீர்மானிக்கும் கொள்கை மற்றும் முறை என்ன?
டிஎன்ஏ நீட்டிப்பை நிறுத்த நியூக்ளியோடைடு சங்கிலி டெர்மினேட்டர்-2,,3,-டைடாக்சிநியூக்ளியோடைடு பயன்படுத்துவதே கொள்கை.3/5/பாஸ்போடைஸ்டர் பிணைப்புகளை உருவாக்குவதற்குத் தேவையான 3-OH இல்லாததால், DNA சங்கிலியில் இணைக்கப்பட்டவுடன், DNA சங்கிலியை மேலும் நீட்டிக்க முடியாது.அடிப்படை இணைத்தல் கொள்கையின்படி, டிஎன்ஏ பாலிமரேசுக்கு பொதுவாக நீட்டிக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ சங்கிலியில் பங்கேற்க டிஎன்எம்பி தேவைப்படும் போதெல்லாம், இரண்டு சாத்தியக்கூறுகள் உள்ளன, ஒன்று டிடிஎன்டிபியில் பங்கேற்பது, இதன் விளைவாக டிஆக்ஸிநியூக்ளியோடைடு சங்கிலி நீட்டிப்பு நிறுத்தப்படுகிறது;மற்றொன்று டிஎன்டிபியில் பங்கேற்பது, அதனால் டிஎன்ஏ சங்கிலி அடுத்த டிடிஎன்டிபி இணைக்கப்படும் வரை நீட்டிக்க முடியும்.இந்த முறையின்படி, டிடிஎன்டிபியில் முடிவடையும் வெவ்வேறு நீளங்களின் டிஎன்ஏ துண்டுகளின் குழுவைப் பெறலாம்.முறையே ddAMP, ddGMP, ddCMP மற்றும் ddTMP என நான்கு குழுக்களாகப் பிரிப்பதே முறை.எதிர்வினைக்குப் பிறகு, பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் நீச்சல் பட்டைகளின்படி டிஎன்ஏ வரிசையைப் படிக்க முடியும்.
7. டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனில் ஆக்டிவேட்டர் புரதத்தின் (CAP) நேர்மறை ஒழுங்குமுறை விளைவு என்ன?
சுழற்சி அடினிலேட் (cAMP) ஏற்பி புரதம் CRP (cAMP ஏற்பி புரதம்), cAMP மற்றும் CRP ஆகியவற்றின் கலவையால் உருவாகும் சிக்கலானது CAP (cAMPactivated protein) என அழைக்கப்படுகிறது.குளுக்கோஸ் இல்லாத ஒரு ஊடகத்தில் ஈ.கோலை வளர்க்கப்படும் போது, ​​CAP இன் தொகுப்பு அதிகரிக்கிறது, மேலும் CAP ஆனது லாக்டோஸ் (Lac) போன்ற ஊக்குவிப்பாளர்களை செயல்படுத்தும் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது.சில CRP-சார்ந்த ஊக்குவிப்பாளர்களுக்கு பொதுவான விளம்பரதாரர்கள் கொண்டிருக்கும் வழக்கமான -35 பிராந்திய வரிசை அம்சம் (TTGACA) இல்லை.எனவே, ஆர்என்ஏ பாலிமரேஸ் அதனுடன் பிணைப்பது கடினம்.CAP இன் இருப்பு (செயல்பாடு): என்சைம் மற்றும் ஊக்குவிப்பாளரின் பிணைப்பு மாறிலியை கணிசமாக மேம்படுத்த முடியும்.இது முக்கியமாக பின்வரும் இரண்டு அம்சங்களைக் காட்டுகிறது: ① CAP ஆனது -10 பகுதியுடன் இணைந்து, -35 பகுதியின் செயல்பாட்டை மாற்றியமைக்கும் வகையில், ஊக்குவிப்பாளரின் இணக்கம் மற்றும் நொதியுடனான தொடர்புகளை மாற்றுவதன் மூலம் நொதி மூலக்கூறை சரியாக நோக்குநிலைப்படுத்த உதவுகிறது.②CAP ஆனது டிஎன்ஏவில் உள்ள மற்ற தளங்களுடன் ஆர்என்ஏ பாலிமரேஸை பிணைப்பதையும் தடுக்கலாம், இதன் மூலம் அதன் குறிப்பிட்ட ஊக்குவிப்பாளருடன் பிணைப்பு நிகழ்தகவை அதிகரிக்கிறது.
8. ஒரு பொதுவான டிஎன்ஏ மறுசீரமைப்பு பரிசோதனையில் பொதுவாக என்ன படிகள் சேர்க்கப்படுகின்றன?
அ.நன்கொடை உயிரினத்தின் இலக்கு மரபணுவை (அல்லது வெளிப்புற மரபணு) பிரித்தெடுக்கவும், மேலும் ஒரு புதிய மறுசீரமைப்பு டிஎன்ஏ மூலக்கூறை உருவாக்க மற்றொரு டிஎன்ஏ மூலக்கூறுடன் (குளோனிங் வெக்டார்) என்சைம் மூலம் இணைக்கவும்.பி.மறுசீரமைப்பு டிஎன்ஏ மூலக்கூறை பெறுநரின் கலத்திற்கு மாற்றவும் மற்றும் பெறுநரின் கலத்தில் அதை நகலெடுத்து பாதுகாக்கவும்.இந்த செயல்முறை மாற்றம் என்று அழைக்கப்படுகிறது.c.மறுசீரமைப்பு டிஎன்ஏவை உறிஞ்சிய அந்த பெறுநரின் செல்களை திரையிட்டு அடையாளம் காணவும்.ஈ.வெளிநாட்டு உதவி மரபணு வெளிப்படுத்தப்படுகிறதா என்பதைக் கண்டறிய மறுசீரமைப்பு டிஎன்ஏவைக் கொண்ட செல்கள் வெகுஜன கலாச்சாரம்.
9. மரபணு நூலகத்தின் கட்டுமானம் மறுசீரமைப்புகளை திரையிடுவதற்கான மூன்று முறைகள் கொடுக்கப்பட்டுள்ளன மற்றும் செயல்முறை சுருக்கமாக விவரிக்கப்பட்டுள்ளது.
ஆன்டிபயாடிக் ரெசிஸ்டன்ஸ் ஸ்கிரீனிங், இன்செர்ஷனல் இன்செக்டிவேஷன் ஆஃப் ரெசிஸ்டன்ஸ், ப்ளூ-ஒயிட் ஸ்பாட் ஸ்கிரீனிங் அல்லது பிசிஆர் ஸ்கிரீனிங், டிஃபெரன்ஷியல் ஸ்கிரீனிங், டிஎன்ஏ ஆய்வு பெரும்பாலான குளோனிங் வெக்டர்கள் ஆண்டிபயாடிக் எதிர்ப்பு மரபணுக்களை (ஆன்டி-ஆம்பிசிலின், டெட்ராசைக்ளின்) கொண்டு செல்கின்றன.பிளாஸ்மிட் Escherichia coli க்கு மாற்றப்படும் போது, ​​பாக்டீரியா எதிர்ப்பைப் பெறும், மற்றும் பரிமாற்றம் இல்லாதவர்களுக்கு எதிர்ப்பு இருக்காது.ஆனால் அது மறுசீரமைக்கப்பட்டதா இல்லையா என்பதை வேறுபடுத்திப் பார்க்க முடியாது.இரண்டு எதிர்ப்பு மரபணுக்களைக் கொண்ட ஒரு வெக்டரில், மரபணுக்களில் ஒன்றில் வெளிநாட்டு DNA துண்டு செருகப்பட்டு, மரபணு செயலிழக்கச் செய்தால், நேர்மறை மறுசீரமைப்புகளைத் திரையிட வெவ்வேறு மருந்துகளைக் கொண்ட இரண்டு தட்டுக் கட்டுப்பாடுகளைப் பயன்படுத்தலாம்.எடுத்துக்காட்டாக, pUC பிளாஸ்மிடில் LacZ மரபணு உள்ளது (என்கோடிங் β-கேலக்டோசிடேஸ்), இது குரோமோஜெனிக் அடி மூலக்கூறு X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) சிதைந்து நீல நிறத்தை உருவாக்குகிறது.வெளிநாட்டு டிஎன்ஏ செருகப்படும் போது, ​​LacZ மரபணுவை வெளிப்படுத்த முடியாது, மேலும் விகாரம் வெண்மையாக இருக்கும், இதனால் மறுசீரமைப்பு பாக்டீரியாவை திரையிடலாம்.
10. கரு ஸ்டெம் செல்கள் மூலம் மரபணு மாற்று விலங்குகளைப் பெறுவதற்கான அடிப்படை செயல்முறையை விளக்குக?
கரு ஸ்டெம் செல்கள் (ES) கரு வளர்ச்சியின் போது கரு உயிரணுக்கள் ஆகும், அவை செயற்கையாக வளர்ப்பு மற்றும் பெருக்கப்படும் மற்றும் பிற வகை உயிரணுக்களில் வேறுபடும் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருக்கும்.ES செல்களின் கலாச்சாரம்: பிளாஸ்டோசிஸ்ட்டின் உள் செல் நிறை தனிமைப்படுத்தப்பட்டு வளர்க்கப்படுகிறது.ஊட்டி இல்லாத அடுக்கில் ES வளர்க்கப்படும் போது, ​​அது தசை செல்கள் மற்றும் N செல்கள் போன்ற பல்வேறு செயல்பாட்டு செல்களாக வேறுபடும்.ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்கள் கொண்ட ஒரு ஊடகத்தில் வளர்க்கப்படும் போது, ​​ES வேறுபாடு செயல்பாட்டை பராமரிக்கும்.ES மரபணு ரீதியாக கையாளப்படலாம், மேலும் அதன் வேறுபாடு செயல்பாட்டை பாதிக்காமல் ஒருங்கிணைக்க முடியும், இது சீரற்ற ஒருங்கிணைப்பின் சிக்கலை தீர்க்கிறது.கரு ஸ்டெம் செல்களில் வெளிப்புற மரபணுக்களை அறிமுகப்படுத்தி, பின்னர் கர்ப்பிணிப் பெண் எலிகளின் கருப்பையில் பொருத்தி, குட்டிகளாக உருவாகி, ஹோமோசைகஸ் எலிகளைப் பெற கடக்க வேண்டும்.