ஃபோர் டைரக்ட் RT-qPCR கிட்
விளக்கம்
ஃபோர் டைரக்ட் RT-qPCR கிட் ஆர்என்ஏ சுத்திகரிப்பு செயல்முறைகள் இல்லாமல் ஸ்வாப் சேகரிப்புகளிலிருந்து ஆர்என்ஏ நேரடி நிகழ்நேர பெருக்கத்திற்காக வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது.இந்த கிட் ஒரு மணி நேரத்திற்குள் qRT-PCR சுழற்சிகளை நிறைவு செய்கிறது.என்சைம் கலவையானது ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ், ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ், ஆர்நேஸ் இன்ஹிபிட்டர் ஆகியவற்றின் உகந்த கலவையாகும்.எதிர்வினை இடையகமானது தேவையான அனைத்து கூறுகளையும் கொண்டுள்ளது, இதில் உகந்த தாங்கல் கூறுகள், Mg2+, dUTP மற்றும் dNTP கள்.
விவரக்குறிப்புகள்
100T
கிட் கூறுகள்
நியூக்ளிக் அமில வெளியீட்டு முகவர் |
ஆர்என்ஏ பாதுகாப்பு |
2× RT-qPCR இடையக |
என்சைம் கலவை(Taq&M-MLV) |
வழிமுறைகள் |
PCR விண்ணப்பம்
1. PCR எதிர்வினை குழாய்கள் சுருக்கமாக மையவிலக்கு செய்யப்பட்டவுடன், அவற்றை பெருக்க கருவியின் மாதிரி தொட்டியில் வைக்கவும்.
2. வெப்ப நெறிமுறை
படி | வெப்ப நிலை | நேரம் | சுழற்சிகள் | |
1 | தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் | 50℃ | 15 நிமிடங்கள் | 1 |
2 | முன் குறைதல் | 95℃ | 1 நிமிடம் | 1 |
3 | டினாடரேஷன் | 95℃ | 10 வினாடிகள் | 42 |
4 | அனீல்/நீட்டிப்பு | 60℃ | 30 வினாடிகள் |
குறிப்பு:ஒவ்வொரு சுழற்சியின் நீட்டிப்புப் படியிலும் உடனடியாக ஃப்ளோரசன்ட் சிக்னல் கண்டறியப்பட்டது.
3. அமைத்த பிறகு, கோப்பைச் சேமித்து, எதிர்வினை நிரலை இயக்கவும்.
செயல்பாட்டு படிகள்
மறுஉருவாக்கம் தயாரிப்பதற்கு முன், கிட்டில் உள்ள அனைத்து எதிர்வினைகளையும் அறை வெப்பநிலையில் கரைத்து மெதுவாக கலக்க வேண்டும்.
எதிர்வினை தயாரிப்பு
1. நியூக்ளிக் அமில வெளியீட்டு கலவையை தயார் செய்யவும்
கூறு | ஒரு மாதிரி அல்லது கட்டுப்பாடுக்கான தொகுதி |
நியூக்ளிக் அமில வெளியீட்டு முகவர் | 5μL |
ஆர்என்ஏ பாதுகாப்பு | 0.5 μL |
2. எதிர்வினை கலவையை தயார் செய்யவும்
கூறு | ஒரு மாதிரி அல்லது கட்டுப்பாடுக்கான தொகுதி |
2× RT-qPCR இடையக | 15 μL |
என்சைம் கலவை(Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
ப்ரைமர்கள் மற்றும் ஆய்வுகள் | 1μL |
சேமிப்பு மற்றும் அடுக்கு வாழ்க்கை
கிட் -20 இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்± 5℃.செல்லுபடியாகும் காலம் 12 மாதங்கள்.
மீண்டும் மீண்டும் உறைதல்-கரை சுழற்சிகளைத் தவிர்க்கவும் (<5 சுழற்சிகள்).