விலங்கு திசு நேரடி PCR கிட்-UNG (மாதிரி கருவிகள் இல்லாமல்) நெறிமுறை
விளக்கங்கள்
இந்த கிட், PCR எதிர்வினைகளுக்காக விலங்குகளின் திசு மாதிரிகளிலிருந்து மரபணு DNAவை விரைவாக வெளியிட ஒரு தனித்துவமான சிதைவு தாங்கல் அமைப்பைப் பயன்படுத்துகிறது, எனவே இது பெரிய அளவிலான மரபணு சோதனைக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.
65 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 10-30 நிமிடங்களுக்குள் லைசிஸ் பஃப்பரிலிருந்து மரபணு டிஎன்ஏவை வெளியிடும் செயல்முறை முடிவடைகிறது.புரதம் மற்றும் RNA அகற்றுதல் போன்ற வேறு எந்த செயல்முறைகளும் தேவையில்லை, மேலும் வெளியிடப்பட்ட டிஎன்ஏவை PCR எதிர்வினைக்கான டெம்ப்ளேட்டாகப் பயன்படுத்தலாம்.
2×PCR எளிதானதுTMMix (UNG) 2×PCR Easy அடிப்படையில் dTTPக்குப் பதிலாக dUTP ஐப் பயன்படுத்துகிறதுTMஒரே நேரத்தில் டியூடிபி கொண்ட டெம்ப்ளேட்டை சிதைக்கக்கூடிய யுஎன்ஜி என்சைமை (யுராசில்-என்-கிளைகோசைலேஸ்) கலந்து, சேர்க்கிறது.பிசிஆர் எதிர்வினைக்கு முன், யுரேசில் கொண்ட பிசிஆர் தயாரிப்பை சிதைக்க யுஎன்ஜி என்சைம் பயன்படுத்தப்படுகிறது.யுராசில் இல்லாத டெம்ப்ளேட்டில் யுஎன்ஜி என்சைம் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தாது, இதன் மூலம் பெருக்கத்தின் தனித்தன்மை மற்றும் துல்லியத்தை உறுதிசெய்து, பெரிய அளவிலான மரபணு சோதனையின் போது பிசிஆர் தயாரிப்புகள் மாசுபடுவதைத் தடுக்கிறது.
டி-டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் என்பது டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ஆகும், இது ஃபோர்ஜீனால் நேரடியாக பிசிஆர் எதிர்வினைகளுக்காக சிறப்பாக உருவாக்கப்பட்டது.டி-டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் பல்வேறு பிசிஆர் எதிர்வினை தடுப்பான்களுக்கு வலுவான சகிப்புத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் பல்வேறு சிக்கலான எதிர்வினை அமைப்புகளில் டிஎன்ஏவின் சுவடு அளவுகளை திறம்பட பெருக்க முடியும், மேலும் பெருக்க வேகம் 2 கேபி/நிமிடத்தை எட்டும், இது நேரடி பிசிஆர் எதிர்வினைக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.
கிட் கூறுகள்
பகுதி I | இடையக AL |
ஃபோர்ஜீன் புரோட்டீஸ் | |
6× டிஎன்ஏ ஏற்றுதல் தாங்கல் | |
பகுதி II | 2×PCR எளிதானதுTMகலவை (UNG) |
அம்சங்கள் மற்றும் நன்மைகள்
■நேரத்தை எடுத்துக்கொள்ளும் மற்றும் விலையுயர்ந்த டிஎன்ஏ சுத்திகரிப்பு இல்லை
■ மாதிரி தேவை சிறியது, 5mg விலங்கு திசுக்களை பரிசோதிக்க முடியும்.
■ அரைத்தல் மற்றும் நசுக்குதல் போன்ற சிறப்பு சிகிச்சை தேவையில்லை, மேலும் அறுவை சிகிச்சை எளிமையானது.
■ உகந்த PCR அமைப்பு PCR ஐ அதிக விவரக்குறிப்பு மற்றும் PCR எதிர்வினை தடுப்பான்களுக்கு வலுவான சகிப்புத்தன்மையை உருவாக்குகிறது.
■ மாசு எதிர்ப்பு PCR அமைப்பு 2×PCR எளிதானதுTMபிசிஆர் தயாரிப்புகளால் ஏற்படும் மாசுபாட்டை மிக்ஸ் (யுஎன்ஜி) திறம்பட நீக்குகிறது மற்றும் பெருக்கத்தின் தனித்தன்மை மற்றும் துல்லியத்தை உறுதி செய்கிறது.
கிட் அளவுருக்கள்
பயன்பாடு: பல்வேறு விலங்கு திசுக்கள்.
மாதிரி சிதைவிலிருந்து வெளியான DNA: PCR டெம்ப்ளேட்டாக மட்டுமே பயன்படுத்தப்படுகிறது.
கிட் பின்வரும் நோக்கங்களுக்காகப் பயன்படுத்தப்படலாம்: டிரான்ஸ்ஜெனோசிஸை அடையாளம் காணுதல், விலங்குகளின் மரபணு வகை, முதலியன.
வேலை ஓட்டம்
சேமிப்பு மற்றும் அடுக்கு வாழ்க்கை
இந்த கிட்டின் பகுதி I 2-8 இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்℃.
ரியாஜென்ட் பஃபர் AL உலர்ந்த நிலையில் 12 மாதங்களுக்கு சேமிக்கப்படும்;இது 2-8 இல் சேமிக்கப்படும்℃நீண்ட சேமிப்புக்காக.
Reagent Foregene Protease ஒரு தனித்துவமான சூத்திரத்தைக் கொண்டுள்ளது.அதன் செயல்பாடு மற்றும் நிலைத்தன்மையை உறுதிப்படுத்த, அதை 4 இல் சேமிக்கவும்℃12 மாதங்களுக்கு.
ரீஜென்ட் 6×டிஎன்ஏ ஏற்றுதல் தாங்கல் 4 இல் சேமிக்கப்படும்℃அல்லது -20℃நீண்ட காலமாக.
இந்த கிட்டின் பகுதி II -20 இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்℃.
ரீஜென்ட் 2×PCR எளிதானதுTMMix(UNG), இது அடிக்கடி பயன்படுத்தப்பட்டால், அதை 4 இல் சேமிக்கலாம்℃குறுகிய கால சேமிப்பிற்காக (10 நாட்களுக்குள் பயன்படுத்தவும்).