RT Easy II(gDNase உடன்) மாஸ்டர் ப்ரீமிக்ஸ், gDNase உடன் ரியல் டைம் PCR க்கான முதல் ஸ்ட்ராண்ட் சிடிஎன்ஏ தொகுப்பு
விவரக்குறிப்புகள்
25×20µl rxns,100×20µl rxns
RT ஈஸிTMII (gDNase உடன்) என்பது மரபணு DNA மாசுபாட்டை விரைவாக அகற்ற நிகழ்நேர PCR க்காக சிறப்பாக உருவாக்கப்பட்ட ஒரு தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் அமைப்பு ஆகும்.5×gDNase கலவையானது 2 நிமிடங்களுக்கு 42°C வெப்பநிலையில் RNAவில் மீதமுள்ள மரபணுவை விரைவாக அகற்றி, qPCR முடிவுகளில் மரபணுவின் குறுக்கீட்டைத் திறம்படத் தவிர்க்கிறது.
5× RO-ஈஸிTMமிக்ஸ் ஃபோர்ஜீனால் சிறப்பாக உருவாக்கப்பட்ட ஃபோர்ஜீன் ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸைக் கொண்டுள்ளது, இது வலுவான ஆர்என்ஏ தொடர்பைக் கொண்ட புதிய வகை தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ் ஆகும்.உகந்த அமைப்பு தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் விகிதத்தை வேகமாக்குகிறது, மேலும் முதல் ஸ்ட்ராண்ட் சிடிஎன்ஏ தொகுப்பு 15 நிமிடங்களில் 42 டிகிரி செல்சியஸில் முடிக்கப்படும்.
இந்த கிட்டின் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் அமைப்பு 50 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் நல்ல செயல்பாட்டை பராமரிக்க முடியும்.எனவே, இது சிக்கலான RNA வார்ப்புருக்களுக்கு மிகவும் சாதகமானது மற்றும் உயர் GC உள்ளடக்கம் மற்றும் சிக்கலான இரண்டாம் நிலை அமைப்புடன் RNA வார்ப்புருக்களை எளிதாகப் படியெடுக்க முடியும்.
கிட் கூறுகள்
5× gDNase கலவை |
5× RO-ஈஸிTMகலக்கவும் |
RNase-இலவச ddH2O |
வழிமுறைகள் |
அம்சங்கள் மற்றும் நன்மைகள்
-ஜிடிஎன்ஏவை அகற்றுவதற்கான திறமையான திறன், இது வார்ப்புருவில் உள்ள ஜிடிஎன்ஏவை 2 நிமிடங்களுக்குள் அகற்றும்.
திறமையான ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் சிஸ்டம், முதல் ஸ்ட்ராண்ட் சிடிஎன்ஏவின் தொகுப்பை முடிக்க 15 நிமிடங்கள் மட்டுமே ஆகும்.
-சிக்கலான வார்ப்புருக்கள்: உயர் GC உள்ளடக்கம் மற்றும் சிக்கலான இரண்டாம் நிலை அமைப்புடன் கூடிய வார்ப்புருக்கள் உயர் செயல்திறனுடன் மாற்றியமைக்கப்படலாம்.
-உயர் உணர்திறன் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் அமைப்பு, pg-நிலை டெம்ப்ளேட்கள் உயர்தர சிடிஎன்ஏவைப் பெறலாம்.
தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் அமைப்பு அதிக வெப்ப நிலைத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது, உகந்த எதிர்வினை வெப்பநிலை 42 ஆகும்℃, மற்றும் இது இன்னும் 50 இல் நல்ல தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் செயல்திறனைக் கொண்டுள்ளது℃.
கிட் பயன்பாடு
மரபணு வெளிப்பாட்டை அளவுரீதியாக பகுப்பாய்வு செய்ய நிகழ்நேர PCR இல் நேரடியாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
இது ஆர்என்ஏ வைரஸ் போன்ற டிரேஸ் ஆர்என்ஏவை விரைவாகவும் துல்லியமாகவும் பகுப்பாய்வு செய்ய முடியும்.
உயர் GC உள்ளடக்கம் அல்லது சிக்கலான இரண்டாம் நிலை அமைப்புடன் RNA டெம்ப்ளேட்களின் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன்.
பணிப்பாய்வு
சேமிப்பு மற்றும் அடுக்கு வாழ்க்கை
கிட் -20 இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்°C.ரசீது கிடைத்த உடனேயே -20 ° C இல் நிலையான வெப்பநிலை குளிர்சாதன பெட்டியில் தயாரிப்பு சேமிக்கவும்.சேமிப்பக நிலைமைகள் பொருத்தமானதாக இருந்தால், 1 வருட செல்லுபடியாகும் காலத்தில் தயாரிப்பு எந்த செயல்திறனையும் குறைக்காது.