ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தல் பற்றி

முப்பது ஆண்டுகளுக்கு முன்பு, ஆர்.என்.ஏ பிரித்தெடுப்பதற்கு, முழுமையான ஆர்.என்.ஏ.வை எப்படிப் பெறுவது என்று மட்டுமே நாம் நினைக்க முடியும், இருப்பினும், பிரித்தெடுக்கும் வேகத்திற்கு எந்தத் தேவையும் இல்லை (முதல் தலைமுறை தொழில்நுட்பம் டிரிசோல் முறை பிறந்தது).ஆர்.என்.ஏ பிரித்தெடுத்தல் தொழில்நுட்பத்தை மீண்டும் மீண்டும் மேம்படுத்துவதன் மூலம், நாம் என்ன செய்ய முடியும் என்பது முடிவுகளைப் பெறுவதற்கு மட்டுப்படுத்தப்படவில்லை.முதல் தலைமுறை ட்ரைசோல்-அடிப்படையிலான உதிரிபாகங்களை பிரித்தெடுப்பதை எதிர்கொள்ளும் போது, ​​சோதனையாளர்கள் பொதுவாக அதன் சிக்கலான செயல்பாட்டு படிகளால் சிரமப்பட்டனர்;பல மேம்படுத்தல்கள் மற்றும் புதுமைகளுக்குப் பிறகு, அது இன்னும் நிறைய நேரம் எடுத்தது.அதே நேரத்தில், பிரித்தெடுக்கும் செயல்பாட்டில் பீனால் மற்றும் குளோரோஃபார்ம் போன்ற கரிம எதிர்வினைகள் பயன்படுத்தப்பட வேண்டும், இது ஒரு குறிப்பிட்ட அளவிற்கு தொடர்புடைய பணியாளர்களின் பாதுகாப்பையும் அச்சுறுத்துகிறது.

திறமையான, வசதியான மற்றும் பாதுகாப்பானது

திறமையான, வசதியான மற்றும் பாதுகாப்பான RNA பிரித்தெடுத்தல் தயாரிப்பைக் கண்டறிவது பரிசோதனையாளர்களின் முதன்மை இலக்காக மாறியுள்ளது.எனவே, ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுப்பதற்கான சிலிக்கா ஸ்பின் வரிசை உறிஞ்சுதல் முறை உருவானது.ஃபோர்ஜீனின் மூன்றாம் தலைமுறை ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தல் தயாரிப்புகள் முந்தைய தலைமுறை நெடுவரிசை பிரித்தெடுத்தல் தயாரிப்புகளின் நன்மைகளைப் பயன்படுத்துகின்றன, (டிஎன்ஏ-சுத்தம் + ஆர்என்ஏ மட்டும்) இரண்டு சுழல் நெடுவரிசை தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி ஒரே நேரத்தில் ஜிடிஎன்ஏ மற்றும் திசு குப்பைகளை அகற்றி, எஞ்சிய ஜிடிஎன்ஏவை டிஎன்ஏஸ் சிகிச்சையின்றி, இனி பினாலைப் பயன்படுத்தாது. .

செயல்பாட்டு செயல்முறை ஒப்பீட்டு விளக்கப்படம்

சோதனை முடிவுகள் ஒப்பீட்டு விளக்கப்படம்

ஃபோர்ஜீன் மொத்த ஆர்என்ஏ தனிமைப்படுத்தல் கருவி அதிக ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தல் விளைச்சல், நல்ல தூய்மை மற்றும் மைஆர்என்ஏவின் பிரித்தெடுத்தல் விளைவு மற்ற பிராண்ட் கிட்களை விட சிறந்தது

பல்வேறு முறைகள் மூலம் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட சுட்டி கல்லீரல் மொத்த ஆர்என்ஏவின் 50 மில்லிகிராம் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்
முதல் தலைமுறை (1: Trizol)
இரண்டாம் தலைமுறை (2: நிறுவனம் A இலிருந்து RNA பிரித்தெடுக்கும் கருவி)
மூன்றாம் தலைமுறை (3: RNA பிரித்தெடுத்தல் கருவி மற்றும் நிறுவனம் A, 4: Foregene:RNA ஐசோலேஷன் கிட்கள்)

qPCR வரைபடம் (பெருக்க வளைவு வரைபடம்)

ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுக்கும் போது ஜீனோமிக் டிஎன்ஏ திறம்பட அகற்றப்பட வேண்டும், இல்லையெனில் அது கீழ்நிலை சோதனைகளில் (ஆரம்ப CT மதிப்பு, தவறான நேர்மறைகள்) கட்டுப்படுத்த முடியாத விளைவுகளை ஏற்படுத்தும்.ஃபோர்ஜீன் அடுத்த தலைமுறை கிட், DNase ஐச் சேர்க்காமலேயே மரபணு DNAவை மிகச்சரியாக அகற்றி, நிறைய நேரத்தை மிச்சப்படுத்துகிறது, அதே நேரத்தில் வெளிப்புற RNase மாசுபாட்டால் ஏற்படும் சிதைவைத் தவிர்க்கிறது.
முதல் தலைமுறை (பச்சை என்பது TRlzol-, சிவப்பு என்பது TRlzol+)

இரண்டாம் தலைமுறை (நீலம் நிறுவனம் A RNA பிரித்தெடுக்கும் கருவியைக் குறிக்கிறது -, சிவப்பு என்பது நிறுவனம் A RNA பிரித்தெடுக்கும் கருவி +)

மூன்றாம் தலைமுறை (நீலம் நிறுவனம் A RNA பிரித்தெடுத்தல் கருவி மற்றும் பச்சை நிறமானது Foregene RNA ஐசோலேஷன் கருவிகளைக் குறிக்கிறது)

(குறிப்பு: qPCR வரைபடத்தில் உள்ள “_” என்பது DNase சேர்க்கப்படவில்லை என்பதையும், DNAவின் மாசு நீக்கப்படவில்லை என்பதையும் குறிக்கிறது; “+” என்பது DNase சேர்க்கப்பட்டதையும், DNAவின் மாசு நீக்கப்பட்டதையும் குறிக்கிறது)

11 நிமிடங்களுக்குள் RNA பிரித்தெடுத்தலை முடிக்கவும்

பல ஆண்டுகளாக நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் அனுபவக் குவிப்பு தேவையில்லை, ஃபோர்ஜீன் உயர்-செயல்திறன் மொத்த RNA ஐசோலேஷன் கிட் தொடர் தயாரிப்புகள் பல்வேறு கீழ்நிலை சோதனைத் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய 11 நிமிடங்களுக்குள் அதிக மகசூல் மற்றும் உயர்-தூய்மை RNA ஐப் பெற உங்களை அனுமதிக்கும்.

இப்போது வரை, ஃபோர்ஜீன் மொத்த ஆர்என்ஏ ஐசோலாட்டன் கிட்கள் தொடர் தயாரிப்புகள் அதிக எண்ணிக்கையிலான வாடிக்கையாளர்களால் அங்கீகரிக்கப்பட்டு பல உயர் மதிப்பெண் இலக்கியங்களுக்கு பங்களித்துள்ளன.பின்னூட்ட எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் விளக்கப்படத்தின் வாடிக்கையாளரின் உண்மையான பயன்பாடு மற்றும் ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனுக்குப் பிறகு அளவு PCR பெருக்க வளைவு ஆகியவை Foregene தயாரிப்புகளின் பயன்பாட்டினால் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட RNA அதிக செறிவு மட்டுமல்ல, நல்ல ஒருமைப்பாடும் இருப்பதைக் காட்டுகிறது.சந்தையால் சோதிக்கப்பட்ட தயாரிப்பு தொழில்நுட்பம் மட்டுமே அனைவராலும் விரும்பப்படும்.

செல் மொத்த RNA ஐசோலேஷன் கிட்

உயர் RNA விளைச்சல்

வேகமாக: 11 நிமிடங்களில் ஆர்என்ஏ தனிமைப்படுத்தலை முடிக்கவும்

பாதுகாப்பு: ஆர்கானிக் கெமிக்கல் எதுவும் சேர்க்கப்படவில்லை

அதிக மதிப்பெண் பெற்ற சில மேற்கோள்கள்:

1. யுவான் ஃபாங், ஜெஜோங் லியு, யாங் கியு, மற்றும் பலர்.டிசைனர் பெப்டைடுகள் மூலம் RNAi புரதங்களின் வைரஸ் அடக்கியை தடுப்பது, vivo, Immunity, 54(10), 2021: 2231-2244.e6 ஆகியவற்றில் உள்ள என்டோவைரல் நோய்த்தொற்றிலிருந்து பாதுகாக்கிறது.(IF:31.745,வைரல் ஆர்என்ஏ ஐசோலேஷன் கிட்,பூனை எண்.RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. ரென், ஒய்., வாங், ஏ., வு, டி. மற்றும் பலர்.மனித சைட்டோமெலகோவைரஸ் புரதம் UL37x1 மூலம் உள்ளார்ந்த நோய் எதிர்ப்பு சக்தி மற்றும் அப்போப்டொசிஸின் இரட்டைத் தடுப்பானது திறமையான வைரஸ் நகலெடுப்பை செயல்படுத்துகிறது.நாட் மைக்ரோபயோல் 7, 1041–1053 (2022).(IF:30.964,செல் மொத்த RNA ஐசோலேஷன் கிட்,பூனை எண்.RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6