ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைம் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.சாதாரண டிஎன்ஏ பாலிமரேஸுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைம் சில குறிப்பிட்ட அல்லாத பெருக்கங்கள் மற்றும் ப்ரைமர் டைமர்களின் உருவாக்கத்தை திறம்பட தவிர்க்கலாம், மேலும் இலக்கு மரபணு பெருக்கத்தின் வெற்றி விகிதத்தை திறம்பட மேம்படுத்தலாம்.குறிப்பாக மரபணு சோதனை துறையில், ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைம் தொழில்துறையில் ஒரு கட்டாய தரநிலையாக அடையாளம் காணப்பட்டுள்ளது, மேலும் சாதாரண டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் பயன்படுத்தப்படக்கூடாது.மேலே இருந்து பார்க்க முடியும், சூடான தொடக்க Taq என்சைம்கள் பரவலாக பயன்படுத்தப்படுகின்றன.தற்போது, ​​உள்நாட்டு சந்தையில் ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைம்களின் பல பிராண்டுகள் உள்ளன, ஆனால் உயர் தரத்துடன் பல ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைம்கள் இல்லை.பல ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைம் தயாரிப்புகளை எதிர்கொண்டால், நாம் எப்படி தேர்வு செய்ய வேண்டும்?

1. அதிக பெருக்க திறன் கொண்ட ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைமைத் தேர்ந்தெடுக்கவும்

PCR பெருக்க செயல்திறன் Taq நொதியின் செயல்திறனுடன் நெருக்கமாக தொடர்புடையது.ஒரு நல்ல Taq என்சைம் எதிர்வினை அமைப்பு மேம்படுத்தப்பட்ட பிறகு, பெருக்க செயல்திறன் 95% க்கு மேல் உள்ளது, மேலும் ஆரம்ப டெம்ப்ளேட் தொகையின் பெருக்க வரம்பு அகலமானது.இலக்கு மரபணு உள்ளடக்கம் குறைவாக இருக்கும்போது திருப்திகரமான பெருக்கத்தைப் பெறலாம், மேலும் டெம்ப்ளேட் அளவு அதிகமாக இருக்கும் போது விஷமாக இருப்பது எளிதானது அல்ல, மேலும் அதிவேக பெருக்க காலம் நீண்டதாக இருக்கும்.மோசமான செயல்திறன் கொண்ட Taq நொதிக்கு, எதிர்வினை அமைப்பு பல முறை மேம்படுத்தப்பட்டிருந்தாலும், பெருக்க செயல்திறன் இன்னும் 90% க்கும் குறைவாக உள்ளது, பெருக்க வளைவின் "S" வடிவம் தெளிவாக இல்லை, சாய்வு சிறியது மற்றும் வளைவு தட்டையானது.வார்ப்புருவின் அளவு குறைவாக இருக்கும்போது, ​​அதை பெருக்க முடியாது, மேலும் வார்ப்புருவின் அளவு அதிகமாக இருக்கும்போது, ​​பெருக்க விளைவு சிறந்ததாக இருக்காது.எனவே, PCR மற்றும் qPCR இன் வெற்றிக்கு உயர் பெருக்க திறன் கொண்ட டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களின் தேர்வு முக்கியமானது.

2. வலுவான என்சைம் சக்தியுடன் சூடான-தொடக்க Taq நொதியைத் தேர்ந்தெடுக்கவும்

Taq நொதியின் நொதி ஆற்றல் பெருக்க திறனுடன் தொடர்புடையது.பொதுவாக, ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைமின் என்சைம் சக்தியானது, PCR பெருக்கத்தின் அதிவேக வளர்ச்சி காலம் நீண்டது, மிகவும் பொதுவான 'S-வடிவ' வளைவு, அதிக ஒளிரும் சமிக்ஞை மதிப்பு மற்றும் மல்டிபிளக்ஸ் PCR கண்டறிதலுக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.பலவீனமான நொதி சக்தி கொண்ட பிராண்ட் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்கள் பொதுவாக 2-பிளக்ஸ் எதிர்வினைகளை மட்டுமே ஆதரிக்கும்.3-பிளக்ஸ் எதிர்வினைகளைச் செய்யும்போது, ​​பெருக்க வளைவு குறைவாக உள்ளது, ஒளிரும் சமிக்ஞை மதிப்பு குறைவாக உள்ளது, மேலும் வழக்கமான பெருக்க வளைவு இல்லை, எனவே முடிவுகளை தீர்மானிக்க கடினமாக உள்ளது.

3. அதிக உணர்திறன் கொண்ட ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைமைத் தேர்ந்தெடுக்கவும்

பொதுவாக, டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் அதிக பெருக்க திறன் மற்றும் அதிக உணர்திறன் கொண்டது, ஆனால் முரண்பாடுகளும் உள்ளன.பெருக்கப்பட வேண்டிய மாதிரியின் இலக்கு மரபணு மிகுதியாக இருந்தால், Taq நொதியின் பெருக்க உணர்திறனைச் சோதிக்க பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.இலக்கு மரபணு பிளாஸ்மிட் துண்டின் 10-மடங்கு அல்லது 5-மடங்கு சாய்வு நீர்த்தலை மேற்கொள்வது, குறைந்த நீர்த்தத்தில் PCR கண்டறிதலை மேற்கொள்வது மற்றும் அதிக கண்டறிதல் உணர்திறன் கொண்ட ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைமைத் தேர்ந்தெடுப்பது மிகவும் பொதுவான கண்டறிதல் முறையாகும்.

ஆராய்ச்சியாளர்கள் தங்கள் சொந்த பரிசோதனை தேவைகள் மற்றும் நிதி நிலைமைகளுக்கு ஏற்ப தேர்வு செய்ய வேண்டும் என்பதை மேலே இருந்து பார்க்க முடியும்.ஹாட்-ஸ்டார்ட் டாக் என்சைமின் பெருக்க திறன் மற்றும் உணர்திறனைக் கண்டறிய, சாய்வு நீர்த்த பெருக்க பரிசோதனை செய்வது சிறந்தது.

Foregene இன் உதாரணம்'s Taq DNA பாலிமரேஸ்:

Foreasy HS Taq DNA பாலிமரேஸ்

விளக்கம்

Foreasy HS Taq DNA பாலிமரேஸ் என்பது மரபணு மறுசீரமைப்பு தொழில்நுட்பத்தின் மூலம் Escherichia coli பொறியியல் பாக்டீரியாவில் வெளிப்படுத்தப்படும் DNA பாலிமரேஸ் ஆகும்.என்சைம் ஒரு தனித்துவமான எதிர்வினை இடையகத்துடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது, இது தயாரிப்பை மிகவும் எதிர்ப்புத் தன்மையுடனும் இணக்கத்தன்மையுடனும் ஆக்குகிறது, மேலும் கண்டறிதல் எதிர்வினைகளுக்கான மாதிரி லைசேட்டை (Foregene Lysis அமைப்பு) நேரடியாகப் பயன்படுத்தலாம்.

விண்ணப்பம்

சுத்திகரிக்கப்பட்ட வார்ப்புருக்கள் மற்றும் சுத்திகரிக்கப்படாத வார்ப்புருக்களின் தரமான PCR மற்றும் அளவு PCR கண்டறிதல்.

தர கட்டுப்பாடு

1.எக்ஸோஜனஸ் நியூக்லீஸ் செயல்பாடு எதுவும் கண்டறியப்படவில்லை

2.பிசிஆர் முறை ஹோஸ்ட் இல்லாமல் எஞ்சிய மரபணு டிஎன்ஏவைக் கண்டறியும்

3.இது மனித ஜீனோமில் உள்ள ஒற்றை நகல் மரபணுக்களை திறம்பட பெருக்க முடியும்

4. அறை வெப்பநிலையில் ஒரு வாரம் சேமிக்கவும், வெளிப்படையான செயல்பாடு மாற்றங்கள்

தயாரிப்பு விவரங்கள்: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/