• முகநூல்
  • இணைக்கப்பட்ட
  • வலைஒளி

பிசிஆர் பிறப்பு

பிசிஆர் (பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை)

பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை கண்டுபிடிக்கப்பட்டு 30 ஆண்டுகளுக்கும் மேலாகிவிட்டது.30 ஆண்டுகளுக்கும் மேலாக, உலகெங்கிலும் உள்ள ஏராளமான அறிஞர்கள் தொடர்ந்து துணைபுரிந்து மேம்படுத்திய பிறகு, PCR தொழில்நுட்பம் முழு வாழ்க்கை அறிவியல் துறையிலும் மிகவும் பரவலாகவும் அடிக்கடி பயன்படுத்தப்படும் மற்றும் மிக முக்கியமான அடிப்படை ஆராய்ச்சி முறையாக மாறியுள்ளது.

TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR போன்றவை பாரம்பரிய PCR தொழில்நுட்பத்தின் பரவலான பயன்பாட்டின் அடிப்படையில் உருவாக்கப்பட்டன, அத்துடன் புதிதாக உருவான டிஜிட்டல் PCR (டிஜிட்டல் PCR), பெரும்பாலான அறிவியல் ஆராய்ச்சியாளர்களின் ஆராய்ச்சி முறைகளை பெரிதும் மேம்படுத்தி, நவீன வாழ்க்கை அறிவியலின் வளர்ச்சியை பெரிதும் துரிதப்படுத்தியுள்ளது.

பிசிஆர் கொள்கை
பாலிமரேஸ்-செயின்-ரியாக்ஷன்-பிசிஆர்

பாரம்பரிய PCR தொழில்நுட்பத்தின் குறைபாடுகள்

சிக்கலான நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தல் மற்றும்பிரித்தெடுத்தல்:

★ பாரம்பரிய PCR தொழில்நுட்பம்: தேவை

★ PCR பெறப்பட்ட தொழில்நுட்பம்: தேவை

★ DNA மற்றும் RNA மாதிரிகள்: பெரிய வேறுபாடுகள், கடினமான செயல்பாட்டுத் தேவைகள்

★ உடல் அபாயங்கள்: நச்சுப் பொருட்கள் உடலுக்கு தீங்கு விளைவிக்கும்

640

பாரம்பரிய PCR தொழில்நுட்பம் மற்றும் வழித்தோன்றல் தொழில்நுட்பம் ஒரு முன்நிபந்தனை-நியூக்ளிக் அமிலம் பிரிப்பு மற்றும் சுத்திகரிப்பு

பிசிஆர் தொழில்நுட்பத்தின் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்யும் நியூக்ளிக் அமில மாதிரிகளைப் பெற, எந்தவொரு உயிரியல் மாதிரியும் சிக்கலான மற்றும் கடினமான மாதிரி செயலாக்கத்தின் மூலம் செல்ல வேண்டும்.

டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏவை பிரித்தல் மற்றும் பிரித்தெடுத்தல் எப்போதும் ஒரு அடிப்படை பணியாக இருந்து வருகிறது, இது தொடர்புடைய அறிவியல் ஆராய்ச்சியாளர்கள் ஒவ்வொரு நாளும் மீண்டும் செய்ய வேண்டும்.

மாதிரிகளுக்கு இடையே உள்ள பெரிய வேறுபாடுகள் காரணமாக, டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏவை பிரித்தல் மற்றும் பிரித்தெடுத்தல் செயல்முறைகள் மிகவும் வேறுபட்டவை.இந்த வேலைக்கு ஆபரேட்டர்களுக்கு உயர் தொழில்நுட்ப திறன் தேவைப்படுகிறது.பாரம்பரிய பிரித்தல் மற்றும் பிரித்தெடுத்தல் நுட்பங்களுக்கு சில அதிக நச்சு இரசாயன உலைகளுடன் நீண்ட கால தொடர்பு தேவைப்படுகிறது.இது ஆபரேட்டரின் உடலுக்கு மாற்ற முடியாத சேதத்தை ஏற்படுத்தும், மேலும் பரிசோதனையின் போது நேரடியாக சேதத்தை ஏற்படுத்தும்.

p5

அதே நேரத்தில், ஆய்வு செய்ய அதிக எண்ணிக்கையிலான மாதிரிகள் உள்ளவர்களுக்கு, நியூக்ளிக் அமிலங்களைப் பிரித்தல் மற்றும் பிரித்தெடுப்பது உழைப்பு மிகுந்த பணியாகும்.

சந்தையில் நியூக்ளிக் அமிலம் தனிமைப்படுத்துதல் மற்றும் பிரித்தெடுத்தல் கருவிகள் இப்போது முதிர்ச்சியடைந்துள்ளன, மேலும் பல பிராண்டுகள் உள்ளன, ஆனால் அவை தோராயமாக ஒரே மாதிரியானவை.அது சிலிக்கா ஜெல் மெம்ப்ரேன் வரிசை மையவிலக்கு கருவியாக இருந்தாலும் சரி அல்லது காந்த மணி முறை கருவியாக இருந்தாலும் சரி, இது அதிக நேரம் எடுக்கும் மற்றும் விலை அதிகம்.கிட் விலைக்கு கூடுதலாக, ஆய்வக உபகரணங்களுக்கான சிறப்புத் தேவைகளும் உள்ளன.காந்த மணி முறையில் பயன்படுத்தப்படும் தானியங்கு பணிநிலையம் மிகவும் பொதுவான பெரிய அளவிலான உயர் மதிப்பு உபகரணமாகும், இது ஆய்வகத்திற்கு பெரும் செலவாகும்.

ப7

சுருக்கமாக

PCR சோதனைகளை நடத்துவதற்கு முன், மாதிரிகளின் முன் சிகிச்சை என்பது ஆராய்ச்சியாளர்களுக்கு தவிர்க்க முடியாதது மற்றும் எப்போதும் தலைவலி.இந்த சிக்கலை எவ்வாறு தீர்ப்பது மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலங்களைப் பிரித்தல் மற்றும் பிரித்தெடுக்காமல் PCR பரிசோதனைகள் செய்ய முடியுமா என்பது பெரும்பாலான அறிவியல் ஆராய்ச்சியாளர்கள் மற்றும் மருத்துவ ஆய்வக பணியாளர்களின் சிந்தனையாகவே இருந்து வருகிறது.

ஃபோர்ஜீனின் தீர்வு

நேரடி PCR தொழில்நுட்பம் மற்றும் தொடர்புடைய கருவிகள் பற்றிய கடினமான ஆராய்ச்சிக்குப் பிறகு, Forgene வெற்றிகரமாக பல இடையூறுகளைத் தகர்த்தெறிந்து, பல வகையான பல்வேறு மாதிரிகளுக்கு வலுவான எதிர்ப்பு மற்றும் தகவமைப்புத் தன்மையுடன் நேரடி PCR ஐ வெற்றிகரமாக அடைந்தது, இது ஆராய்ச்சியாளர்கள் சிக்கலான மற்றும் ஆபத்தான பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலங்களைப் பிரித்தெடுப்பதை அனுமதிக்கிறது.இது அனைவரின் உழைப்புத் தீவிரத்தையும் வெகுவாகக் குறைக்கும், பரிசோதனை செயல்முறையை விரைவுபடுத்தும், மேலும் அறிவியல் ஆராய்ச்சி மற்றும் சோதனைச் செலவுகளைச் சேமிக்கும்.

ஃபோர்ஜீனின் DirectPCR பற்றிய புரிதல் மற்றும் அறிவு

முதலாவதாக, DirectPCR தொழில்நுட்பம் என்பது பல்வேறு உயிரியல் மாதிரி திசுக்களுக்கான நேரடி PCR தொழில்நுட்பமாகும்.இந்த தொழில்நுட்ப நிபந்தனையின் கீழ், நியூக்ளிக் அமிலங்களைப் பிரித்து பிரித்தெடுக்க வேண்டிய அவசியமில்லை, மேலும் திசு மாதிரி நேரடியாக பொருளாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் பிசிஆர் எதிர்வினைக்கு இலக்கு மரபணு ப்ரைமர்கள் சேர்க்கப்படுகின்றன.

இரண்டாவதாக, டைரக்ட்பிசிஆர் தொழில்நுட்பம் ஒரு பாரம்பரிய டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் பெருக்க தொழில்நுட்பம் மட்டுமல்ல, ஆர்என்ஏ டெம்ப்ளேட் ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் பிசிஆரையும் உள்ளடக்கியது.

மூன்றாவதாக, டைரக்ட்பிசிஆர் தொழில்நுட்பம் திசு மாதிரிகளில் வழக்கமான தரமான பிசிஆர் எதிர்வினைகளை நேரடியாகச் செய்வது மட்டுமல்லாமல், நிகழ்நேர qPCR எதிர்வினைகளையும் உள்ளடக்கியது, இதற்கு எதிர்வினை அமைப்பு பின்னணி ஒளிரும் குறுக்கீட்டை எதிர்க்கும் மற்றும் எண்டோஜெனஸ் ஃப்ளோரசன்ஸ் தணிப்பான்களை எதிர்க்கும் வலுவான திறனைக் கொண்டிருக்க வேண்டும்.

நான்காவதாக, டைரக்ட்பிசிஆர் தொழில்நுட்பத்தால் குறிவைக்கப்பட்ட திசு மாதிரிகள் நியூக்ளிக் அமில வார்ப்புருக்களை மட்டுமே வெளியிட வேண்டும் மற்றும் பிசிஆர் எதிர்வினைக்கு இடையூறு விளைவிக்கும் புரதங்கள், பாலிசாக்கரைடுகள், உப்பு அயனிகள் போன்றவற்றை அகற்றாது.இதற்கு எதிர்வினை அமைப்பில் உள்ள நியூக்ளிக் அமிலம் பாலிமரேஸ் மற்றும் PCR மிக்ஸ் ஆகியவை சிறந்த எதிர்-திருப்புத்தன்மை மற்றும் பொருந்தக்கூடிய தன்மையைக் கொண்டிருக்க வேண்டும், மேலும் சிக்கலான நிலைமைகளின் கீழ் நொதி செயல்பாடு மற்றும் பிரதி துல்லியத்தை உறுதிப்படுத்த முடியும்.

ஐந்தாவது, டைரக்ட்பிசிஆர் தொழில்நுட்பத்தால் குறிவைக்கப்பட்ட திசு மாதிரிகள் எந்த நியூக்ளிக் அமில செறிவூட்டல் சிகிச்சைக்கும் உட்படுத்தப்படவில்லை, மேலும் டெம்ப்ளேட் அளவு மிகவும் சிறியது, இதற்கு எதிர்வினை அமைப்பின் மிக அதிக உணர்திறன் மற்றும் பெருக்க திறன் தேவைப்படுகிறது.

முடிவுரை

பிசிஆர் தொழில்நுட்பம் பிறந்ததில் இருந்து கடந்த 30 ஆண்டுகளில் ஏற்பட்ட மிக முக்கியமான தொழில்நுட்ப மேம்பாடுகள் மற்றும் கண்டுபிடிப்புகளில் டைரக்ட்பிசிஆர் தொழில்நுட்பம் ஒன்றாகும்.ஃபோர்ஜீன் இந்த தொழில்நுட்பத்தின் முன்னோடியாகவும், கண்டுபிடிப்பாளராகவும் இருந்து வருகிறார்.

DirectPCR தொழில்நுட்பத்தின் பயன்பாட்டு வாய்ப்பு மிகவும் விரிவானது.இந்தத் தொழில்நுட்பத்தின் தொடர்ச்சியான மேம்பாடு மற்றும் ஊக்குவிப்பு விஞ்ஞான ஆராய்ச்சி மற்றும் ஆய்வுப் பணிகளில் நிச்சயமாக நாசகரமான மாற்றங்களைக் கொண்டுவரும்.இது ஒரு PCR தொழில்நுட்ப புரட்சி.


இடுகை நேரம்: பிப்-21-2017