நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் என்பது மூலக்கூறு உயிரியல் சோதனைகளுக்கான ஒரு அறிமுகத் திறன் ஆகும்.இந்த திறமையில் தேர்ச்சி பெற்று திறமையாகப் பயன்படுத்த முடியுமா என்பது, பின்னர் பரிசோதனை செய்பவர்களுக்கு சோதனை முதுநிலைக்கு மேம்படுத்துவதற்கு ஒரு முன்நிபந்தனையாகிவிட்டது.
வெவ்வேறு ஆராய்ச்சிப் பொருட்களின் படி, பரிசோதனையாளர்கள் முக்கியமாக பின்வரும் மூன்று வகைகளாகப் பிரிக்கப்பட்டுள்ளனர்:
அனிமல் மேஜர், பிளாண்ட் மேஜர், மைக்ரோபயாலஜி மேஜர்
ஒவ்வொரு வகை பரிசோதனையாளரும் குறிப்பிட்ட மாதிரிகளுக்கான பிரத்யேக திறன்களின் தொகுப்பை வளர்ப்பதற்கு நகல்களை தொடர்ந்து நகலெடுப்பார்கள்.
இன்று, நிலவறை வழியாக கிடைக்காத சில உபகரணங்களையும் முட்டுக்கட்டுகளையும் சோதனையாளர்களுக்கு கொண்டு வர ஆசிரியர் விரும்புகிறார்.அவற்றைக் கொண்டு, நீங்கள் எல்லா திசைகளிலும் விரைவாக மேம்படுத்தலாம்.சோதனைக் கடவுளாக மாறுவது கனவு அல்ல.
இந்த பிரச்சினை தாவர தொழில்முறை பரிசோதனையாளர்களுக்கானது (பிற தொழில்களில் பரிசோதனை செய்பவர்களும் இதிலிருந்து கற்றுக்கொள்ளலாம்~).
ஒவ்வொரு தலைமுறை பரிசோதனையாளர்களும் தங்கள் முன்னோடிகளிடமிருந்து தலைமுறையிலிருந்து தலைமுறைக்கு அனுப்பப்பட்ட உன்னதமான தாவர நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் முறைகளைப் பற்றி கேள்விப்பட்டிருப்பார்கள் என்று நான் நம்புகிறேன்.ஆலை பிரித்தெடுக்கும் துறையில் மூன்று பெரிய பெயர்கள்.
பெரிய ஆட்கள் சிறந்தவர்கள் என்றாலும், இன்னும் சில தவிர்க்க முடியாத குறைபாடுகள் உள்ளன.
TRIzol முறை
பெரும்பாலும் பிரித்தெடுக்கப் பயன்படுகிறது
ஆர்.என்.ஏ
●நச்சு மற்றும் சிக்கலானது
●ஜீனோம் மாசுபாடு கொண்டது
CTAB முறை
பெரும்பாலும் பிரித்தெடுக்கப் பயன்படுகிறது
மரபணுடிஎன்ஏ
●நேர விரயம்
●உப்பைக் கழுவுவதன் மூலம் CTAB ஐ அகற்றுவது மிகவும் கடினம், ஒரு சிறிய அளவு எச்சம் என்சைம் செயல்பாட்டில் பெரும் தாக்கத்தை ஏற்படுத்தும்
SDS முறை
பெரும்பாலும் பிரித்தெடுக்கப் பயன்படுகிறது
பிளாஸ்மிட்
●அதிக பாலிசாக்கரைடு உள்ளடக்கம் கொண்ட தாவரங்களுக்கு ஏற்றது அல்ல
●புரத மாசுபாடு
இரட்டை வேக புதுப்பிப்புகள் கொண்ட இந்த நவீன சமுதாயத்தில், பாரம்பரிய செயல்பாட்டு முறைகள் இனி பரிசோதனையாளர்களின் தேவைகளை பூர்த்தி செய்ய முடியாது, மேலும் உபகரண மேம்படுத்தல்கள் உடனடியாக உள்ளன.
Foregene Nucleic Acid Extraction Kit டஜன் கணக்கான பரிசோதனையாளர்களால் N முறை சோதிக்கப்பட்டது.இது செயல்பட எளிதானது, எந்த நச்சு எதிர்வினைகளையும் பயன்படுத்தாது மற்றும் எந்த நொதிகளையும் சேர்க்காது.பெறப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலம் அதிக தூய்மை கொண்டது, இது சிறந்த பரிசோதனையாளர்களின் தினசரி பிரித்தெடுத்தல் செயல்பாட்டிற்கு அவசியம்.
ஃபோர்ஜீன் ஆர்என்ஏ ஐசோலேஷன் கிட்
சில தாவர பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் பாலிபினால்கள் அதிக உள்ளடக்கம் மற்றும் பாரம்பரிய முறைகள் ஆபத்தானவை என்பதால், தாவர வகைக்கு ஏற்ப பொருத்தமான பிரித்தெடுக்கும் முறையைத் தேர்ந்தெடுப்பது (தாவர வகையைத் தீர்மானிக்கும் முறை கட்டுரையின் முடிவில் உள்ளது!) சோதனையாளர்களுக்கு ஒரு மறைக்கப்பட்ட செயல்பாட்டு நுட்பத்தையும் இங்கே வெளிப்படுத்துகிறேன்.கட்டுப்படுத்த போதாது.
அட, இப்படித்தான்...
TRIzol முறையானது வாழை இலைகள், ஜின்கோ இலைகள் மற்றும் பருத்தி இலைகள் போன்ற பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் பாலிபினால்கள் போன்றவற்றின் மாதிரிகளின் கீழ் நேரடியாக மண்டியிட்டது.
இந்த நோக்கத்திற்காக, ஃபோர்ஜீன் சோதனையாளர்களுக்கு இரண்டு பயனுள்ள கருவிகளை உருவாக்கியுள்ளது.குறைந்த பாலிசாக்கரைடு மற்றும் பாலிஃபீனால் உள்ளடக்கம் மற்றும் அதிக பாலிசாக்கரைடு மற்றும் பாலிஃபீனால் கொண்ட தாவர RNA பிரித்தெடுத்தல் கருவி எதிரிகளை இலக்காகக் கொல்லும், இதனால் பரிசோதனையாளர்கள் இனி வெவ்வேறு தாவரங்களுக்கு பயப்பட மாட்டார்கள்.உபகரணங்களை நேரடியாக மாற்றவும்!
பிரித்தெடுக்கும் முறையை மேம்படுத்த வேண்டிய தேவைக்கு கூடுதலாக, மாதிரி முன் செயலாக்க செயல்பாடுகளும் மேம்படுத்தப்பட வேண்டும்.
தாவர மாதிரிகளின் சிறப்பு அமைப்பு காரணமாக, சில தாவரங்களின் வேர்கள் மற்றும் கடினமான தண்டுகள் சமமாக அரைத்து நசுக்குவது மிகவும் கடினம்.
அரைக்கும் தொழிலில், சுமார் 80% மக்கள் திரவ நைட்ரஜனை அரைப்பதற்கு பயன்படுத்துகின்றனர், அதே சமயம் 20%க்கும் குறைவானவர்கள் மின்சார அரைக்கும் மற்றும் மணி ஊசலாட்டத்தை அரைக்கும்.
திரவ நைட்ரஜன் அரைப்பது மலிவானது மற்றும் பயன்படுத்த எளிதானது என்றாலும், ஒவ்வொரு முறையும் முயற்சியும் அரைக்க ஒரு பெரிய மாதிரி தேவை கொண்ட பரிசோதனையாளர்களுக்கு இது ஒரு கனவு!மோட்டார் சுத்தம் செய்யப்படாவிட்டால், அது மாதிரிகளுக்கு இடையில் குறுக்கு மாசுபாட்டை ஏற்படுத்தும்.
மின்சார அரைப்பதன் விளைவு நபருக்கு நபர் மாறுபடும், மேலும் பரிசோதனையாளர்களின் செயல்பாட்டு பழக்கவழக்கங்கள் நியூக்ளிக் அமிலத்தின் ஒருமைப்பாட்டின் மீது அதிக தாக்கத்தை ஏற்படுத்தும், தேவைப்பட்டால் குறைந்த வெப்பநிலை செயல்பாடு தேவைப்படுகிறது.
எனவே, அரைக்கும் மணி ஊசலாட்டத்தை தற்போதைய எளிய மற்றும் பயனுள்ள அரைக்கும் கருவியாகக் கருதலாம்.
பொதுவான அலைவு முறைகளில் செங்குத்து அலைவு, கிடைமட்ட பரஸ்பர அலைவு மற்றும் முப்பரிமாண (கிடைமட்ட அலைவு) ஆகியவை அடங்கும்.இருப்பினும், ஃபோர்ஜீனின் திசு நொறுக்கி, ஏற்கனவே உள்ள மாதிரியை உடைத்து, அரைப்பதை மிகவும் சீரானதாக மாற்ற புதிய 4D அலைவு முறையைப் பின்பற்றுகிறது.
பல்வேறு மாதிரி தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்யுங்கள், செயல்பட எளிதானது
தனித்துவமான 4D நசுக்கும் தொழில்நுட்பம், நசுக்கும் திறன் 20% அதிகரித்துள்ளது
மாதிரி முற்றிலும் இணைக்கப்பட்டுள்ளது, குறுக்கு-மாசு இல்லை
அமைதியானது, ≤56 டெசிபல்கள்
சோதனையின் முடிவுகளை அலையுடன் ஒப்பிடுக~
சோதனை மாதிரி: 50mg கோதுமை இலைகள் (பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் பாலிபினால்களின் குறைந்த உள்ளடக்கம்)
பிரித்தெடுக்கும் நியூக்ளிக் அமில வகை: RNA
ஸ்பாட் அளவு: 5μl
பயன்படுத்தப்படும் பிரித்தெடுத்தல் கருவி Foregene Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05011)
தரவு மற்றும் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் வரைபடத்தை ஒப்பிடுகையில், இயந்திர அரைத்த பிறகு பிரித்தெடுக்கப்பட்ட ஆர்என்ஏவின் செறிவு மற்றும் தூய்மை திரவ நைட்ரஜனை அரைப்பதை விட அதிகமாக இருப்பதைக் காணலாம்.அதே நேரத்தில், இயந்திர அரைக்கும் மாதிரியை முழுவதுமாக உடைக்க முடியும் என்பதால், சிறிய ஆர்என்ஏவை சிறப்பாக பிரித்தெடுக்க முடியும் மற்றும் ஆர்என்ஏவின் நேர்மையை பராமரிக்க முடியும்.
சோதனை மாதிரி: 50mg ஜின்கோ இலைகள் (அதிக பாலிசாக்கரைடு மற்றும் பாலிபினால் உள்ளடக்கம்)
பிரித்தெடுக்கும் நியூக்ளிக் அமில வகை: RNA
ஸ்பாட் அளவு: 5μl
Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05021) ஐப் பயன்படுத்துதல்
பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் பாலிபினால்களின் அதிக உள்ளடக்கம் கொண்ட இந்த மாதிரிகளின் குழுவைப் பாருங்கள்.விளைவு இன்னும் வெளிப்படையானது.அதே தூய்மையுடன், இயந்திர அரைக்கும் ஆர்என்ஏவின் செறிவு திரவ நைட்ரஜனை அரைப்பதை விட கிட்டத்தட்ட 5 மடங்கு அதிகமாகும், மேலும் சிறிய ஆர்என்ஏ இன்னும் மங்கலாகத் தெரியும்~
மேலே உள்ள எந்த உபகரணமும் போதுமான வேகத்தில் இல்லை என்று நீங்கள் உணர்ந்தால், எடிட்டர் இறுதி உபகரணங்களைக் கொண்டு வர வேண்டும்!
நேரடி PCR தொடர்களை நடவும்
இந்த உபகரணத்தின் தனித்துவமான அம்சம் என்னவென்றால், தாவர இலைகள் அல்லது விதைகள் தரையில் மற்றும் உடைக்கப்பட வேண்டிய அவசியமில்லை, மேலும் அவை நேரடியாக EP குழாயில் சிதைவுக்காக வீசப்படுகின்றன, மேலும் இதன் விளைவாக வரும் சிதைவு கலவையை PCR எதிர்வினைக்கான டெம்ப்ளேட்டாகப் பயன்படுத்தலாம்.இது ஒரு படி வேகமானது போல எளிமையானது!அதே நேரத்தில், ஃபோர்ஜீன் தாவரங்களின் நேரடி PCR தொடர் UNG மாசு எதிர்ப்பு அமைப்புடன் பொருத்தப்பட்டுள்ளது, இதனால் பரிசோதனையாளர்கள் இனி ஆய்வகத்தில் ஏரோசல் மாசுபாடு பற்றி கவலைப்பட மாட்டார்கள் மற்றும் பரிசோதனையை எளிதாக எடுக்க முடியும்.
தீர்ப்பு குறிப்புகள்:
இது பாலிசாக்கரைடு பாலிபினால் ஆலை என்பதை எவ்வாறு தீர்மானிப்பது
சுமார் 20mg திசுத் தொகுதியை எடுத்து சுத்தமான 1.5ml மையவிலக்குக் குழாயில் வைத்து, 200ul 200mM NaOH கரைசலைச் சேர்த்து, 95℃ல் 10 நிமிடம் வைக்கவும், சிதைவுக்குப் பிறகு நிறம் மாறுவதைக் கவனிக்கவும்.
1. லைசேட்டின் நிறம் பச்சை அல்லது வெளிர் மஞ்சள் நிறமாக இருந்தால், திசு பாலிபினால்களின் உள்ளடக்கம் குறைவாக உள்ளது என்று அர்த்தம், மேலும் ஃபோர்ஜீன் தாவரத் தொடரைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
2. லைசேட் பழுப்பு-மஞ்சள் அல்லது பழுப்பு-சிவப்பு நிறத்தில் இருந்தால், திசு பாலிபினால் உள்ளடக்கம் அதிகமாக உள்ளது என்று அர்த்தம், மேலும் ஃபோர்ஜீன் பாலிசாக்கரைடு பாலிபினால் ஆலை பிளஸ் சீரிஸைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
இடுகை நேரம்: ஆகஸ்ட்-20-2021
