வைரல் டிஎன்ஏ&ஆர்என்ஏ ஐசோலேஷன் கிட் வைரல் டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தல் சுத்திகரிப்பு தயாரிப்பு கருவிகள்
விவரக்குறிப்புகள்
50 தயார்படுத்தல்கள், 200 தயார்படுத்தல்கள்
வைரல் ஆர்என்ஏ நியூக்ளிக் அமிலம் சுத்திகரிப்பு பிரித்தெடுத்தல் தனிமைப்படுத்தல் கருவியானது ஃபோர்ஜீன் உருவாக்கிய ஸ்பின் நெடுவரிசை மற்றும் ஃபார்முலாவைப் பயன்படுத்துகிறது, இது பிளாஸ்மா, சீரம், செல்-ஃப்ரீ பாடி ஃப்ளூயிட் மற்றும் செல் கல்ச்சர் சூப்பர்நேட்டன்ட் போன்ற மாதிரிகளிலிருந்து உயர்-தூய்மை மற்றும் உயர்தர வைரஸ் ஆர்என்ஏவைத் திறமையாகப் பிரித்தெடுக்கும்.கிட் குறிப்பாக லீனியர் அக்ரிலாமைடைச் சேர்க்கிறது, இது மாதிரிகளிலிருந்து சிறிய அளவிலான ஆர்என்ஏவை எளிதாகப் பிடிக்க முடியும்.ஆர்என்ஏ-ஒன்லி நெடுவரிசையால் ஆர்என்ஏவை திறமையாக பிணைக்க முடியும்.கிட் ஒரே நேரத்தில் அதிக எண்ணிக்கையிலான மாதிரிகளை செயலாக்க முடியும்.
முழு தொகுப்பிலும் RNase இல்லை, எனவே சுத்திகரிக்கப்பட்ட RNA சிதைந்துவிடாது.Buffer viRW1 மற்றும் Buffer viRW2 ஆகியவை பெறப்பட்ட வைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலம் புரதம், நியூக்லீஸ் அல்லது பிற அசுத்தங்கள் இல்லாமல் இருப்பதை உறுதி செய்ய முடியும், இது கீழ்நிலை மூலக்கூறு உயிரியல் சோதனைகளுக்கு நேரடியாகப் பயன்படுத்தப்படலாம்.
கிட் கூறுகள்
நேரியல் அக்ரிலாமைடு |
இடையக DRL |
Buffer RW1, Buffer RW2 |
RNase-இலவச ddH2O |
டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ நெடுவரிசை |
வழிமுறைகள் |
அம்சங்கள் மற்றும் நன்மைகள்
■ ஐஸ் குளியல் மற்றும் குறைந்த வெப்பநிலை மையவிலக்கு இல்லாமல், முழு செயல்முறையிலும் அறை வெப்பநிலையில் (15-25℃) செயல்பாடு.
■ முழுமையான RNase-இலவச கிட், RNA சிதைவு பற்றி கவலைப்பட தேவையில்லை.
■ அதிக நியூக்ளிக் அமிலம் விளைச்சல்: டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ-மட்டுமே நெடுவரிசை மற்றும் தனித்துவமான சூத்திரம் டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏவை திறமையாக சுத்திகரிக்க முடியும்.
■ பெரிய மாதிரி செயலாக்க திறன்: ஒவ்வொரு முறையும் 200μl மாதிரிகள் வரை செயலாக்கப்படும்.
■ வேகமான வேகம்: செயல்பட எளிதானது மற்றும் 20 நிமிடங்களில் முடிக்க முடியும்.
■ பாதுகாப்பு: ஆர்கானிக் ரீஜென்ட் தேவையில்லை.
■ உயர் தரம்: சுத்திகரிக்கப்பட்ட RNA துண்டுகள் அதிக தூய்மையானவை, புரதம் மற்றும் பிற அசுத்தங்கள் இல்லாதவை, மேலும் பல்வேறு கீழ்நிலை சோதனை பயன்பாடுகளை சந்திக்க முடியும்.
கிட் பயன்பாடு
பிளாஸ்மா, சீரம், செல் இல்லாத உடல் திரவம் மற்றும் உயிரணு வளர்ப்பு சூப்பர்நேட்டன்ட் போன்ற மாதிரிகளில் வைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலத்தை பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிக்க இது பொருத்தமானது.
வேலை ஓட்டம்
வரைபடம்
சேமிப்பு மற்றும் அடுக்கு வாழ்க்கை
■ இந்த கருவியை அறை வெப்பநிலையில் (15-25℃) உலர்ந்த நிலையில் 24 மாதங்களுக்கு சேமிக்கலாம்;அதிக நேரம் சேமித்து வைக்க வேண்டுமானால், 2-8℃ வெப்பநிலையில் சேமிக்கலாம்.
■ லீனியர் அக்ரிலாமைடு கரைசலை அறை வெப்பநிலையில் 7 நாட்களுக்கு சேமிக்கலாம்;கருவியைப் பெற்ற பிறகு, தயவுசெய்து அதை வெளியே எடுத்து -20 ° C வெப்பநிலையில் சேமிக்கவும்.
■ லீனியர் அக்ரிலாமைடை பஃபர் டிஆர்எல்லில் சேர்த்த பிறகு, அதை 2-8 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 48 மணிநேரம் வரை சேமிக்கலாம்.தயாராக தயாரிக்கப்பட்ட தீர்வைப் பயன்படுத்தவும்.
சிக்கல் பகுப்பாய்வு வழிகாட்டி
வைரஸ் டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவைப் பிரித்தெடுப்பதில் எதிர்கொள்ளக்கூடிய சிக்கல்களின் பகுப்பாய்வு, உங்கள் சோதனைகளுக்கு உதவியாக இருக்கும் என்று நம்புகிறது.கூடுதலாக, செயல்பாட்டு வழிமுறைகள் மற்றும் சிக்கல் பகுப்பாய்வு தவிர பிற சோதனை அல்லது தொழில்நுட்ப சிக்கல்களுக்கு, உங்களுக்கு உதவ நாங்கள் தொழில்நுட்ப ஆதரவை அர்ப்பணித்துள்ளோம்.உங்களுக்கு ஏதேனும் தேவைகள் இருந்தால், எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும்: 028-83360257 அல்லது மின்னஞ்சல்:
Tech@foregene.com.
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் அல்லது குறைந்த நியூக்ளிக் அமில விளைச்சல் இல்லை
மீட்டெடுப்பு செயல்திறனைப் பாதிக்கும் பல காரணிகள் பொதுவாக உள்ளன, அவை: மாதிரி நியூக்ளிக் அமில உள்ளடக்கம், செயல்பாட்டு முறை, நீக்குதல் அளவு போன்றவை.
பொதுவான காரணங்களின் பகுப்பாய்வு:
1. செயல்முறையின் போது ஒரு பனி குளியல் அல்லது குறைந்த வெப்பநிலை (4 ° C) மையவிலக்கு செய்யப்பட்டது.
பரிந்துரை: முழு செயல்முறையிலும் அறை வெப்பநிலையில் (15-25 ° C) இயக்கவும், பனி குளியல் மற்றும் குறைந்த வெப்பநிலை மையவிலக்கு செய்ய வேண்டாம்.
2. மாதிரி தவறாக சேமிக்கப்பட்டது அல்லது மாதிரி அதிக நேரம் சேமிக்கப்பட்டது.
பரிந்துரை: மாதிரிகளை -80 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் சேமித்து, மீண்டும் மீண்டும் உறைதல் மற்றும் கரைவதைத் தவிர்க்கவும்;நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுப்பதற்கு புதிதாக சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரிகளைப் பயன்படுத்த முயற்சிக்கவும்.
3. போதுமான மாதிரி சிதைவு.
பரிந்துரை: தயவு செய்து மாதிரி மற்றும் சிதைவு வேலை தீர்வு முற்றிலும் கலந்து அறை வெப்பநிலையில் (15-25 ° C) 10 நிமிடங்களுக்கு அடைகாக்கப்படுவதை உறுதி செய்யவும்.
4. எலுவென்ட்டின் தவறான சேர்த்தல்.
பரிந்துரை: சுத்திகரிப்பு நெடுவரிசையின் நடுவில் RNase-Free ddH2O துளியாகச் சேர்க்கப்பட்டுள்ளதை உறுதிசெய்து, அதை சுத்திகரிப்பு நெடுவரிசை வளையத்தில் விட வேண்டாம்.
5. பஃபர் RW2 இல் முழுமையான எத்தனாலின் சரியான அளவு சேர்க்கப்படவில்லை.
பரிந்துரை: தயவு செய்து வழிமுறைகளைப் பின்பற்றவும், பஃபர் RW2 இல் முழுமையான எத்தனாலின் சரியான அளவைச் சேர்த்து, கிட்டைப் பயன்படுத்துவதற்கு முன் நன்கு கலக்கவும்.
6. பொருத்தமற்ற மாதிரி தொகுதி.
பரிந்துரை: ஒவ்வொரு 500µl இடையக DRLக்கும் 200µl மாதிரி செயலாக்கப்படுகிறது.அதிகப்படியான மாதிரி செயலாக்கம் குறைந்த நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் விளைச்சலுக்கு வழிவகுக்கும்.
7. பொருத்தமற்ற எலுஷன் அளவு அல்லது முழுமையற்ற எலுஷன்.
பரிந்துரை: சுத்திகரிப்பு நெடுவரிசையின் eluent தொகுதி 30-50μl;நீக்குதல் விளைவு திருப்திகரமாக இல்லாவிட்டால், 5-10நிமிடங்கள் போன்ற முன்சூடாக்கப்பட்ட RNase-Free ddH2O ஐச் சேர்த்த பிறகு அறை வெப்பநிலையில் நேரத்தை நீட்டிக்க பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
8. Buffer RW2 உடன் கழுவிய பிறகு எத்தனால் நெடுவரிசையில் இருக்கும்.
பரிந்துரை: எத்தனால் இடையக RW2 உடன் மையவிலக்கு செய்த பிறகு 2 நிமிடங்கள் இருந்தால், மீதமுள்ள எத்தனாலை முழுவதுமாக அகற்ற, மையவிலக்கு செய்த பிறகு 5 நிமிடங்களுக்கு அறை வெப்பநிலையில் நெடுவரிசையை வைக்கலாம்.
சுத்திகரிக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலம் சிதைக்கப்படுகிறது
சுத்திகரிக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலத்தின் தரமானது மாதிரியின் பாதுகாப்பு, RNase மாசுபாடு, செயல்பாடு மற்றும் பிற காரணிகளுடன் தொடர்புடையது.பொதுவான காரணங்களின் பகுப்பாய்வு:
1. சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரிகள் சரியான நேரத்தில் சேமிக்கப்படவில்லை.
பரிந்துரை: சேகரிப்புக்குப் பிறகு சரியான நேரத்தில் மாதிரி பயன்படுத்தப்படாவிட்டால், உடனடியாக அதை குறைந்த வெப்பநிலையில் -80 ° C இல் சேமிக்கவும்.ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுப்பதற்கு, புதிதாக சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரிகளைப் பயன்படுத்த முயற்சிக்கவும்.
2. மாதிரிகளை சேகரித்து, மீண்டும் மீண்டும் உறைய வைத்து கரைக்கவும்.
பரிந்துரை: மாதிரிகள் சேகரிக்கும் மற்றும் சேமிப்பின் போது உறைதல் மற்றும் உருகுவதை (ஒருமுறைக்கு மேல் அல்ல) தவிர்க்கவும், இல்லையெனில் நியூக்ளிக் அமிலம் விளைச்சல் குறையும்.
3. அறுவை சிகிச்சை அறையில் RNase அறிமுகப்படுத்தப்பட்டது அல்லது செலவழிப்பு கையுறைகள், முகமூடிகள் போன்றவை அணியப்படுவதில்லை.
பரிந்துரை: ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தல் பரிசோதனைகள் ஒரு தனி ஆர்என்ஏ அறுவை சிகிச்சை அறையில் சிறப்பாகச் செய்யப்படுகின்றன, மேலும் பரிசோதனைக்கு முன் ஆய்வக அட்டவணையை சுத்தம் செய்ய வேண்டும்.
RNase இன் அறிமுகத்தால் ஏற்படும் ஆர்என்ஏ சிதைவைத் தவிர்க்க பரிசோதனையின் போது செலவழிக்கக்கூடிய கையுறைகள் மற்றும் முகமூடிகளை அணியுங்கள்.
4. வினைப்பொருளானது RNase மூலம் மாசுபட்டது.
பரிந்துரை: தொடர்புடைய சோதனைகளுக்கு புதிய வைரல் டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ ஐசோலேஷன் கிட் மூலம் மாற்றவும்.
5. ஆர்என்ஏ கையாளுதலுக்கு பயன்படுத்தப்படும் மையவிலக்கு குழாய்கள் மற்றும் பைபெட் குறிப்புகள் RNase உடன் மாசுபட்டுள்ளன.
பரிந்துரை: ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுக்கப் பயன்படுத்தப்படும் மையவிலக்கு குழாய்கள், பைப்பெட் குறிப்புகள், பைப்பெட்டுகள் போன்றவை அனைத்தும் RNase-இல்லாதவை என்பதை உறுதிப்படுத்தவும்.
சுத்திகரிக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலம் கீழ்நிலை சோதனைகளை பாதிக்கிறது
டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ ஆகியவை சுத்திகரிப்பு நெடுவரிசையால் சுத்திகரிக்கப்படுகின்றன, உப்பு அயனி மற்றும் புரத உள்ளடக்கம் அதிகமாக இருந்தால், அது கீழ்நிலை சோதனைகளை பாதிக்கும், அதாவது: பிசிஆர் பெருக்கம், தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் போன்றவை.
1. நீக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ எஞ்சிய உப்பு அயனிகளைக் கொண்டுள்ளன.
பரிந்துரை: பஃபர் RW2 இல் முழுமையான எத்தனாலின் சரியான அளவு சேர்க்கப்பட்டுள்ளதா என்பதை உறுதிசெய்து, இயக்க வழிமுறைகளில் குறிப்பிடப்பட்டுள்ள மையவிலக்கு வேகத்தில் சுத்திகரிப்பு நெடுவரிசையை இரண்டு முறை கழுவவும்;உப்பு அயனி மாசுபாட்டைக் குறைக்க மையவிலக்குகளைச் செய்யவும்.
2. நீக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏவில் எத்தனால் எச்சங்கள் உள்ளன.
பரிந்துரை: Buffer RW2 உடன் சலவை செய்வதை உறுதிசெய்த பிறகு, இயக்க வழிமுறைகளில் மையவிலக்கு வேகத்தில் வெற்று குழாய் மையவிலக்கத்தைச் செய்யவும்;இன்னும் எத்தனால் எச்சம் இருந்தால், நீங்கள் வெற்றுக் குழாயை மையவிலக்கு செய்து பின்னர் அறை வெப்பநிலையில் 5 நிமிடங்கள் வைத்து எத்தனால் எச்சத்தை அதிக அளவில் அகற்றலாம்.
அறிவுறுத்தல் கையேடுகள்:
வைரல் டிஎன்ஏ&ஆர்என்ஏ ஐசோலேஷன் கிட் அறிவுறுத்தல் கையேடு