ஆய்வக சோதனையானது மாதிரி சேகரிப்பில் தொடங்குகிறது, மற்றும் மாதிரி சேகரிப்பு என்பது கவனிக்காமல் விட எளிதானது.மாதிரி சேகரிப்புக்கான மிக முக்கியமான விஷயம், சரியான மாதிரி வகையைத் தேர்ந்தெடுத்து, பொருத்தமான மாதிரி கருவிகளைப் பயன்படுத்துதல் மற்றும் நியாயமான போக்குவரத்து மற்றும் செயலாக்கத்தை மேற்கொள்வது.
I. மாதிரி வகை
பொதுவான மாதிரி வகைகள் பின்வருமாறு:
விவசாய வர்த்தக (பஜார்) சந்தையில் புதிய கொரோனா வைரஸின் சுற்றுச்சூழல் கண்காணிப்புக்கான தொழில்நுட்ப விவரக்குறிப்புகளை மாதிரி முறை குறிப்பிடலாம்.
1. தொண்டை துடைப்பான்கள், கைகள், உடைகள் மற்றும் பயிற்சியாளர்களின் பிற பொருட்களிலிருந்து ஸ்வாப் மாதிரிகள்: வைரஸ் மாதிரி குழாயில் வைரஸ் பாதுகாப்பு கரைசலைப் பயன்படுத்த வேண்டும் மற்றும் மாதிரி பருத்தி துணியில் முழுமையாக ஊடுருவ வேண்டும்.தரையின் மேற்பரப்பு) மீண்டும் மீண்டும் பயன்படுத்தப்பட்டு 3 முறைக்கு மேல் துவைக்கப்படுகிறது.அதே நேரத்தில், மாதிரி செய்யப்பட்ட பொருளின் மேற்பரப்பில் பல-புள்ளி விநியோகிக்கப்பட்ட மாதிரியைச் செய்வது அவசியம்.
2. உணவு மேற்பரப்பு ஸ்வாப் மாதிரிகள்: உணவு மாதிரிகளை நேரடியாக சேகரிக்க முடியாது.ஸ்வாப் மாதிரிகளை சேகரிப்பதற்கு முன் சேகரிக்கப்படும் உணவை கவனமாக பிரித்து சுத்தமான மாதிரி பையில் சேமிக்க வேண்டும்.மாதிரி பருத்தி துணியை முழுவதுமாக ஊறவைத்த பின், மீண்டும் மீண்டும் தடவி, 3 முறைக்கு மேல் சேகரிக்கப்பட வேண்டிய உணவு மாதிரியின் மேற்பரப்பை துவைக்க, வைரஸ் மாதிரிக் குழாயில் வைரஸ் பாதுகாப்புக் கரைசலைப் பயன்படுத்த வேண்டும்.அதே நேரத்தில், மாதிரி மேற்பரப்பில் பல-புள்ளி விநியோகிக்கப்பட்ட மாதிரியைச் செய்வது அவசியம்.
3. கழிவுநீர் மாதிரிகள்: சந்தையில் உள்ள வடிகால் அமைப்பின் விநியோகத்தின் படி, 2-3 கழிவுநீர் மாதிரி இடங்களைத் தேர்ந்தெடுக்கவும், உள் குழாய் நெட்வொர்க் சேகரிப்பு, நீர் ஓட்டம் திசையின் கீழ்நோக்கி அல்லது நகராட்சி குழாய் நெட்வொர்க்குடனான இணைப்பு ஆகியவற்றில் கவனம் செலுத்துகிறது.ஒரு ஸ்வாப் மாதிரியை சேகரிக்க, சாம்பிள் காட்டன் ஸ்வாப் மூலம் கழிவுநீரில் மூழ்கி, கழிவுநீரை உறிஞ்சி, மாதிரி குழாயில் 3 முறைக்கு மேல் துவைக்க வேண்டும்.கழிவுநீர் மாதிரிகளை சேகரிக்க, பாலிஎதிலின் பிளாஸ்டிக் பாட்டில்களைப் பயன்படுத்தி 30-500 மில்லி கழிவுநீர் மாதிரிகளை சேகரிக்கவும்;500 mL க்கும் அதிகமான அளவு கொண்ட கழிவுநீர் சேகரிப்புக்கு, பாலிஎதிலின் பிளாஸ்டிக் வாளிகள் அல்லது ஆன்-சைட் தண்ணீர் மாதிரி சிறப்பு செறிவூட்டல் கருவிகளைப் பயன்படுத்தலாம்.அதே நேரத்தில், கழிவுநீர் மாதிரி இடத்திற்கான பல-புள்ளி விநியோகிக்கப்பட்ட மாதிரியை நடத்துவது அவசியம்.
4. விலங்கு மாதிரிகள்: உயிருள்ள விலங்குகளுக்கு, மாதிரி ஸ்வாப்களைப் பயன்படுத்தி உடல் மேற்பரப்பு ஸ்வாப்கள், ஓரோபார்ஞ்சீயல் ஸ்வாப்கள் மற்றும் குத ஸ்வாப்கள் மற்றும் மலம் அல்லது சுரப்பு மாதிரிகள் சேகரிக்கப்பட்டு பதிவு தாளில் பதிவு செய்யப்படலாம்.தோல் உரித்தல் போன்றவற்றுக்கு உட்பட்ட விலங்குகளின் மாதிரிகளுக்கு, பருத்தி துணியால் அவற்றின் உடல் மேற்பரப்பு மற்றும் உடல் குழி துடைப்பான் மாதிரிகளை சேகரிக்கவும்.மாதிரி பருத்தி துணியை முழுமையாக ஊடுருவிச் செல்ல வைரஸ் மாதிரிக் குழாயில் உள்ள வைரஸ் பாதுகாப்புக் கரைசலைப் பயன்படுத்த வேண்டும், பின்னர் சேகரிக்கப்பட வேண்டிய உணவு மாதிரியின் மேற்பரப்பை மீண்டும் பயன்படுத்த வேண்டும்.ஷாபு 3 முறைக்கு மேல்.அதே நேரத்தில், மாதிரி மேற்பரப்பில் பல-புள்ளி விநியோகிக்கப்பட்ட மாதிரியைச் செய்வது அவசியம்.
5. பிற உபகரணங்கள்: கூண்டுகள் அல்லது மீன் தொட்டிகள் போன்ற விலங்குகளை கொண்டு செல்ல மற்றும் இனப்பெருக்கம் செய்வதற்கான கொள்கலன்கள்.முதலில், கொள்கலனில் சேமிக்கப்பட்டு வளர்க்கப்படும் குறிப்பிட்ட வகை விலங்குகளைக் கவனிக்கவும் அல்லது புரிந்து கொள்ளவும், மேலும் கொள்கலனின் உள் சுவரில் உள்ள ஸ்வாப் மாதிரிகள் அல்லது உள்ளடக்கங்களின் திரவ மாதிரிகளை சேகரிக்கவும்.
6. மக்கள் கூடும் பகுதிகள், காற்றோட்டம் இல்லாத உள்ளூர் வர்த்தகப் பகுதிகள், அலுவலகங்கள் மற்றும் ஓய்வு அறைகளில் ஏரோசல் மாதிரிகளை சேகரிக்கவும்.
II. மாதிரி கருவிகள்
1. இரத்த சேகரிப்பு குழாய்
நீங்கள் பின்னர் நியூக்ளிக் அமில சோதனை மற்றும் ஆன்டிகோகுலண்ட் மாதிரிகள் செய்ய வேண்டும் என்றால், இரத்தத்தை சேகரிக்க EDTA ஆன்டிகோகுலண்ட் கொண்ட வெற்றிட இரத்த நாளத்தைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது;சீரம் மாதிரிகளுக்கு, ஆன்டிகோகுலண்ட் இல்லாமல் ஒரு வெற்றிட இரத்த நாளத்தைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.
2. மாதிரி துடைப்பான்
கால்சியம் ஆல்ஜினேட் ஸ்வாப்கள் அல்லது மரக் கம்பங்களைக் கொண்ட ஸ்வாப்களுக்குப் பதிலாக பாலிப்ரோப்பிலீன் ஸ்வாப்களைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது, ஏனெனில் அவை சில வைரஸ்களை செயலிழக்கச் செய்யும் மற்றும் PCR சோதனையைத் தடுக்கும் பொருட்களைக் கொண்டிருக்கலாம்.பருத்தித் தலைகள் கொண்ட ஸ்வாப்களைப் பயன்படுத்த முடியாது, ஏனெனில் பருத்தி இழைகள் புரதத்தின் வலுவான உறிஞ்சுதலைக் கொண்டுள்ளன, மேலும் அவை அடுத்தடுத்த பாதுகாப்பு கரைசலில் எளிதில் வெளியேற்றப்படுவதில்லை.
"புதிய கொரோனா வைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலங்களின் 10-இன்-1 கலப்பு சேகரிப்பு மற்றும் கண்டறிதலுக்கான தொழில்நுட்ப விவரக்குறிப்புகள்", "மாதிரி ஸ்வாப் பாலியஸ்டர், நைலான் மற்றும் பிற பருத்தி அல்லாத மற்றும் கால்சியம் அல்லாத ஆல்ஜினேட் பொருட்களால் செய்யப்பட வேண்டும், மேலும் கைப்பிடி மரம் அல்லாத பொருட்களால் செய்யப்பட வேண்டும்" என்று தெளிவாகக் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது.ஸ்வாப் தலையின் மேற்புறத்தில் இருந்து உடைக்கும் புள்ளி சுமார் 3 செமீ தொலைவில் உள்ளது, இது உடைக்க எளிதானது.
யுனைடெட் ஸ்டேட்ஸில் உள்ள CDC மேலும் குறிப்பிடுகிறது “பிளாஸ்டிக் அல்லது கம்பி தண்டுகளுடன் செயற்கை இழை துணியால் மட்டுமே பயன்படுத்தவும்.கால்சியம் ஆல்ஜினேட் ஸ்வாப்ஸ் அல்லது மரத்தண்டுகளுடன் கூடிய துடைப்பான்களைப் பயன்படுத்த வேண்டாம்,அவை சில வைரஸ்களை செயலிழக்கச் செய்யும் மற்றும் PCR சோதனையைத் தடுக்கும் பொருட்களைக் கொண்டிருக்கலாம்.
தற்போது பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுவது ஒரு டிஸ்போசபிள் ஸ்டெரைல் நைலான் ஃபிளாக்கிங் ஸ்வாப் ஒரு பிளாஸ்டிக் கம்பியுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது.மந்தையான ஸ்வாப் சிறந்த நீர் உறிஞ்சுதல் மற்றும் வெளியீட்டு விகிதத்தைக் கொண்டுள்ளது.வெவ்வேறு மாதிரி தளங்களின்படி, ஸ்வாப் தலையில் வெவ்வேறு அளவுகள் மற்றும் இழைகள் உள்ளன.தடிமன்.”
3. மாதிரி போக்குவரத்து பாதுகாப்பு தீர்வு
வைரஸ் செயலிழக்க பாதுகாப்பு தீர்வு: சரியான அளவு குவானிடின் உப்பு செறிவு மற்றும் பல்வேறு வைரஸ் சிதைவு கூறுகள் நேரடியாக வைரஸை லைஸ் செய்து நியூக்ளிக் அமிலத்தை வெளியிடலாம், RNase மற்றும் DNase ஐ செயலிழக்கச் செய்யலாம் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலத்தின் ஒருமைப்பாட்டை உறுதி செய்யலாம்.வைரஸ் வளர்ப்பிற்கும் தனிமைப்படுத்தலுக்கும் இதைப் பயன்படுத்த முடியாது.
வைரஸ் போக்குவரத்து மற்றும் பாதுகாப்பு தீர்வு: வைரஸின் செயல்பாட்டைத் தக்கவைக்கும் வைரஸின் உயிர்வாழ்வதற்குத் தேவையான உப்புகள், அமினோ அமிலங்கள், வைட்டமின்கள், குளுக்கோஸ் மற்றும் புரதம் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது.இது நியூக்ளிக் அமிலத்தைப் பிரித்தெடுக்கவும், எதிர்காலத்தில் வைரஸைக் கண்டறியவும் பயன்படுத்தப்படலாம், மேலும் இது வைரஸை வளர்ப்பதற்கும் பிரிப்பதற்கும் பயன்படுத்தப்படலாம்.
4. மாதிரி பாதுகாப்பு குழாய் மற்றும் மாதிரி பை
மாதிரி சேமிப்பு குழாய் நியூக்ளிக் அமிலத்தை உறிஞ்சாத ஒரு திருகு தொப்பியுடன் கூடிய மலட்டு பிளாஸ்டிக் குழாயாக இருக்க வேண்டும்.மாதிரி கசிவு மற்றும் மாசுபடுவதைத் தடுக்க ஒவ்வொரு மாதிரிக் குழாயையும் ஒரு மாதிரி பையால் மூட வேண்டும்.
III.மாதிரியில் குறுக்கிடும் பொருட்கள்
PCR சோதனைகளில் குறுக்கிடும் பொருட்கள்
1. எண்டோஜெனஸ் குறுக்கீடு
உடல் மாதிரியில் உள்ள பொருட்கள் மற்ற பொருட்களைக் கண்டறிவதில் தலையிடலாம்.
இரத்தம்:ஹீம் (>1mg/ml), ஹெமின் (>0.1ng/μl), ட்ரைகிளிசரைடுகள், IgG போன்றவை;
சிறுநீர்:யூரியா (20 மிமீ);
மலம்:ஆலை பாலிசாக்கரைடுகள், சோலேட்;
திசு:புரோட்டீஸ், கொலாஜன்;
பால்: புரோட்டீஸ், கால்சியம் அயன்;
மருந்துகள்: நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகள், வைரஸ் தடுப்பு மருந்துகள், ஹார்மோன்கள் போன்றவை.
மற்றவை.
2. வெளிப்புற குறுக்கீடு
இது விட்ரோவில் உள்ள பிற பொருட்களைக் கண்டறிவதில் தலையிடக்கூடிய பொருட்களிலிருந்து வருகிறது.மாதிரி சேகரிப்பு மற்றும் செயலாக்கத்தின் போது தொடர்பு கொள்ளக்கூடிய மாதிரி சேர்க்கைகள் மற்றும் பொருட்கள்:
சோதனை பொருட்கள்: சீரம் பிரிப்பு ஜெல், மாதிரி சேகரிப்பு கொள்கலன் மற்றும் ரப்பர் தடுப்பான், வடிகுழாய், வடிகுழாய் ஃப்ளஷிங் திரவம், கையுறை தூள் போன்றவை.
ஆன்டிகோகுலண்ட்: ஹெப்பரின் (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), முதலியன;
கரிம கரைப்பான்கள்: ஐசோப்ரோபனோல் (>0.1 IU/ml), பீடைன், டைமிதில் சல்பாக்சைடு, ஃபார்மைடு, கிளிசரின், PEG போன்றவை;
கிருமிநாசினிகள்: ஆல்கஹால்கள் (எத்தனால்>1%), ஆல்டிஹைடுகள், பீனால்கள் (பீனால்>0.2%), பெராக்சைடுகள், வலுவான அமிலங்கள் (HCL), வலுவான காரங்கள் (NaOH) போன்றவை;
சவர்க்காரம்:SDS (>0.005%);
மண்: மட்கிய
சாயம்: இண்டிகோ
மற்றவை.
சுற்றுச்சூழல் மாதிரிகளை சேகரிப்பது போன்ற உண்மையான வெளிப்புற மாதிரி நிலைமைகளின் கீழ், மாதிரிகள் பல்வேறு குறுக்கிடக்கூடிய பொருட்களைக் கொண்டிருக்கலாம், மேலும் ஒவ்வொரு இடத்திலும் உள்ள குறுக்கீடு செய்யும் பொருட்களின் கலவை வேறுபட்டது, உள்ளூர் நிலைமைகளுக்கு ஏற்ப PCR குறுக்கீடு பரிசோதனைகள் மேற்கொள்ளப்பட வேண்டும்.
IV.மாதிரி சேமிப்பு மற்றும் போக்குவரத்து நிலைமைகள்
புதிதாக சேகரிக்கப்பட்ட மருத்துவ மாதிரிகள் 2 ° C முதல் 8 ° C வரை சேகரிக்கப்பட்ட 2 முதல் 4 மணி நேரத்திற்குள் ஆய்வகத்திற்கு அனுப்பப்பட வேண்டும்.24 மணிநேரத்திற்குள் 4℃ இல் சேமிக்கவும்.வைரஸ் தனிமைப்படுத்தல் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலத்தைக் கண்டறிவதற்குப் பயன்படுத்தப்படும் மாதிரிகள் கூடிய விரைவில் சோதிக்கப்பட வேண்டும்.24 மணி நேரத்திற்குள் சோதனை செய்யக்கூடிய மாதிரிகள் 4 ° C இல் சேமிக்கப்படும்;24 மணி நேரத்திற்குள் கண்டறிய முடியாத மாதிரிகள் -70 டிகிரி செல்சியஸ் அல்லது அதற்குக் கீழே சேமிக்கப்பட வேண்டும் (இல்லையெனில் - 70 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் -20 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் குளிர்சாதன பெட்டியில் சேமிக்கவும்).
சுருக்கம்:தரப்படுத்தப்பட்ட சேகரிப்பு, போக்குவரத்து மற்றும் மாதிரிகளின் சேமிப்பு ஆகியவை அடுத்தடுத்த சோதனைகளுக்கு அவசியம்.பல ஆய்வக சோதனைகளின் தவறான எதிர்மறைகள், வைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலத்தின் சிதைவுக்கு வழிவகுக்கும் மாதிரிகளின் முறையற்ற சேகரிப்பு, போக்குவரத்து மற்றும் சேமிப்பு ஆகியவற்றால் ஏற்படுகிறது.இருப்பினும், பல ஆய்வகங்கள் இன்னும் மாதிரியின் முக்கியத்துவத்தை புறக்கணிக்கின்றன.இந்தக் கட்டுரையானது மாதிரி எடுப்பதில் அனைவரின் கவனத்தையும் எழுப்பி மேலும் அறிவியல் மற்றும் நியாயமான மாதிரிகளை உருவாக்க முடியும் என்று நம்புகிறேன்!
தொடர்புடைய தயாரிப்பு:
SARS-CoV-2 மாறுபாடு நியூக்ளிக் அமிலம் கண்டறிதல் கிட் (I) (மல்டிபிளக்ஸ் PCR ஃப்ளோரசன்ட் ஆய்வு முறை)-பிரேசில், தென்னாப்பிரிக்கா மற்றும் யுகேவிலிருந்து மரபுபிறழ்ந்தவர்களைக் கண்டறிவதற்காக
இடுகை நேரம்: செப்-17-2021