SOP அமைப்பை உருவாக்குதல்

பரிசோதனை பணியாளர்களின் நடத்தையை தரப்படுத்த PCR பரிசோதனை SOP ஐ நிறுவவும்.

பரிசோதனையாளர்கள் இயக்க நடைமுறைகளை கண்டிப்பாக கடைபிடிக்கிறார்கள், மேலும் மனித காரணிகளால் ஏற்படக்கூடிய PCR மாசுபாட்டைக் குறைக்கிறார்கள் அல்லது செயல்பாட்டில் மாசு ஏற்படுவதைத் தடுக்கிறார்கள்.கூடுதலாக, பரிசோதனை செய்பவர் தொடர்புடைய உபகரணங்களை இயக்குவதில் தேர்ச்சி, முழு வேலை செயல்முறையையும் தெளிவுபடுத்துதல், மாசுபாட்டின் சிகிச்சை முறைகள் மற்றும் ஆய்வக தரக் கட்டுப்பாட்டு முறைகளில் தேர்ச்சி பெறுதல் மற்றும் சோதனை முடிவுகளை சரியாக விளக்குவது உள்ளிட்ட தொழில்முறை அறிவு மற்றும் திறன்களைக் கொண்டிருக்க வேண்டும்.

நிலையான PCR ஆய்வகத்தை உருவாக்குதல்

PCR ஆய்வகம் கொள்கையளவில் நான்கு பகுதிகளாகப் பிரிக்கப்பட்டுள்ளது, அதாவது மறுஉருவாக்க தயாரிப்பு பகுதி, மாதிரி செயலாக்கப் பகுதி, பெருக்கப் பகுதி மற்றும் பெருக்க தயாரிப்பு பகுப்பாய்வு பகுதி.முதல் இரண்டு பகுதிகள் பெருக்கத்திற்கு முந்தைய பகுதிகள், கடைசி இரண்டு பகுதிகள் பிந்தைய பெருக்க பகுதிகள்.பெருக்கத்திற்கு முந்தைய மண்டலமும், பெருக்கத்திற்குப் பிந்தைய மண்டலமும் கண்டிப்பாகப் பிரிக்கப்பட வேண்டும்.சோதனைப் பொருட்கள், ரியாஜெண்டுகள், ரெக்கார்டிங் பேப்பர், பேனாக்கள், துப்புரவுப் பொருட்கள் போன்றவை முன்-பெருக்கப் பகுதியிலிருந்து பெருக்கத்திற்குப் பிந்தைய பகுதிக்கு, அதாவது, வினைப்பொருள் தயாரிப்புப் பகுதி, மாதிரி செயலாக்கப் பகுதி, பெருக்கப் பகுதி மற்றும் பெருக்க தயாரிப்பு பகுப்பாய்வு பகுதி ஆகியவற்றிலிருந்து மட்டுமே பாய முடியும், மேலும் அவை தலைகீழ் திசையில் பாயக்கூடாது.ஆய்வகத்திலுள்ள காற்றோட்டமானது, பெருக்கத்திற்கு முந்தைய பகுதியிலிருந்து பெருக்கத்திற்குப் பிந்தைய பகுதிக்கு, தலைகீழ் திசையில் அல்ல.

சோதனை நடவடிக்கைகளை குறைக்கவும்

ஆய்வகம் PCR கண்டறிதல் மற்றும் அடையாளத்தை மட்டுமே செய்தால், வழக்கமான PCR க்குப் பதிலாக ஃப்ளோரசன்ட் அளவு PCR ஐப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.

ஃப்ளோரசன்ஸின் அளவு PCR கண்டறிதல் முடிவுகளை ஃப்ளோரசன்ட் சிக்னல்கள் மூலம் சேகரிக்கலாம் மற்றும் பகுப்பாய்வு செய்யலாம், எனவே எதிர்வினைக்குப் பிறகு எலக்ட்ரோபோரேசிஸிற்கான மூடியைத் திறக்க வேண்டிய அவசியமில்லை, இது ஏரோசோல்களை உருவாக்க எதிர்வினை தயாரிப்புகளின் கசிவால் ஏற்படும் PCR தயாரிப்புகளின் மாசுபாட்டைத் தவிர்க்கிறது.ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் ஏற்றுதல் படியின் போது தொப்பி திறப்புகளின் எண்ணிக்கையை நீங்கள் அதிகரித்தால், ஏரோசல் மாசு ஏற்பட வாய்ப்புள்ளது.அளவு PCR பயன்பாட்டை ஊக்குவிக்கவும், படிப்படியாக தரமான PCR ஐ மாற்றவும் பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.

யுஎன்ஜி மாசு எதிர்ப்பு அமைப்பை ஏற்றுக்கொள்ளுங்கள்

பிசிஆர் எதிர்வினைக்கு யுஎன்ஜி எதிர்ப்பு பிசிஆர் தயாரிப்பு மாசுபடுத்தும் அமைப்பு பயன்படுத்தப்படுகிறது.

கணினி dTTPக்குப் பதிலாக dUTP ஐப் பயன்படுத்துகிறது.PCR எதிர்வினைக்குப் பிறகு, அனைத்து PCR தயாரிப்புகளும் (DNA துண்டுகள்) dUTP உடன் இணைக்கப்படுகின்றன;PCR வினையின் அடுத்த சுற்றில், கணினியில் சேர்க்கப்படும் UNG நொதி PCRக்கு 5 நிமிடங்களுக்கு முன் 37°C வெப்பநிலையில் அடைக்கப்படுகிறது, இது குறிப்பிட்டதாக இருக்கலாம் dUTP உள்ள அனைத்து DNA துண்டுகளையும் சிதைத்து, பின்னர் PCR வினையைச் செய்யலாம்.இது PCR தயாரிப்புகளால் ஏற்படும் ஏரோசல் மாசுபாட்டை முற்றிலும் அகற்றும்.விளைவு கீழே உள்ள படத்தில் காட்டப்பட்டுள்ளது:

குறிப்பு: நேரடி PCR தொடருக்கு, FJ Biotech இன் PCR எதிர்ப்பு தயாரிப்பு மாசுபாட்டின் தொடர் தயாரிப்புகளை நீங்கள் தேர்வு செய்யலாம்.

பரிந்துரை

பெரிய அளவிலான மரபணு வகை சோதனைகளை நடத்தும் ஆய்வகங்களுக்கு, நியாயமான ஆய்வகங்களை நிர்மாணிப்பதைத் தவிர, ரியாஜெண்டுகளை பரிசோதிக்க UNG எதிர்ப்பு PCR தயாரிப்பு மாசுபடுத்தும் முறையைப் பயன்படுத்த கடுமையாக பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.

நினைவூட்டல்: இந்த அமைப்பைப் பயன்படுத்துவதால் ஏற்கனவே ஏற்பட்டுள்ள PCR தயாரிப்பு மாசுபாட்டை அகற்ற முடியாது.எனவே, யுஎன்ஜி அமைப்பு தொடர்புடைய சோதனையின் தொடக்கத்தில் பயன்படுத்தப்பட வேண்டும், மேலும் பிசிஆர் தயாரிப்புகள் மாசுபடுவதைத் தடுக்க, பிசிஆர் பெருக்கத்திற்கு யுஎன்ஜி அமைப்பு எப்போதும் பயன்படுத்தப்பட வேண்டும்.பொய்யான உண்மை.

பெரிய அளவிலான சோதனைகளை மேற்கொள்ளும் போது ஃபோர்ஜ் பயோடெக் இன் நேரடி PCR-UNG முறையைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது, அதாவது: தாவர இலை நேரடி PCR கிட்-UNG;

தாவர விதை நேரடி PCR கிட்-UNG

விலங்கு திசு நேரடி PCR கிட்-UNG

மவுஸ் டெயில் நேரடி PCR கிட்-UNG

வரிக்குதிரை மீன் நேரடி PCR கிட்-UNG.

Foregene வழங்கும் இந்தத் தொடர் கருவிகள் PCR கண்டறிதலை விரைவாகவும் பெரிய அளவிலும் செய்வது மட்டுமல்லாமல், PCR தயாரிப்பு மாசுபாட்டைத் தடுக்கவும் கட்டுப்படுத்தவும் முடியும்.