• முகநூல்
  • இணைக்கப்பட்ட
  • வலைஒளி

1: சோதனைப் பொருட்களை சரியான நேரத்தில் மாற்றவும்

news812 (1) 

(NTC) எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டை அமைத்து, அதை பலமுறை செய்யவும்.ஆய்வகத்தில் PCR தயாரிப்பு மாசுபாடு இருப்பதைக் கண்டறிந்ததும், அனைத்து சோதனைப் பொருட்களையும் சரியான நேரத்தில் மாற்றவும்.போன்றவை: ப்ரைமர்களை மீண்டும் நீர்த்துப்போகச் செய்து தயார் செய்தல், பைபெட் முனை, EP குழாய், ddH2O போன்றவற்றை மீண்டும் கிருமி நீக்கம் செய்தல், ஒரு புதிய பைப்பேட்டை மாற்றுதல் மற்றும் PCR பரிசோதனைகளைச் செய்ய மற்ற ஆய்வகங்களைத் தற்காலிகமாக கடன் வாங்குதல்.பரிசோதனையைத் தொடரும் முன் PCR தயாரிப்பு மாசு நீக்கப்படும் வரை அசுத்தமான ஆய்வகம் காற்றோட்டம் மற்றும் புற ஊதாக் கதிர்களால் கதிரியக்கப்படுத்தப்பட வேண்டும்.

2: UV வெளிப்பாடு நேரத்தை நீட்டிக்கவும்

news812 (2)

டிஎன்ஏ மாசுபாட்டை அகற்ற, வழக்கமான புற ஊதா கதிர்வீச்சு வழக்கத்தை விட 2 மணிநேரம் நீட்டிக்கப்பட வேண்டும் என்பது குறிப்பிடத்தக்கது.இருப்பினும், டிஎன்ஏ மாசுபாட்டின் சிறிய துண்டுகளை (200 பிபிக்குக் கீழே) அகற்றுவதில் புற ஊதா கதிர்வீச்சின் விளைவு இன்னும் நன்றாக இல்லை.

புற ஊதா அலைநீளம் (nm) பொதுவாக 254/300nm ஆகும், மேலும் இது 30 நிமிடங்களுக்கு கதிர்வீச்சு செய்ய போதுமானது.மீதமுள்ள PCR தயாரிப்புகளின் மாசுபாட்டை அகற்ற UV ஐத் தேர்ந்தெடுக்கும்போது, ​​PCR தயாரிப்பின் நீளம் மற்றும் தயாரிப்பு வரிசையில் உள்ள தளங்களின் விநியோகம் ஆகியவற்றைக் கருத்தில் கொள்ள வேண்டும் என்பதைக் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும்.புற ஊதா கதிர்வீச்சு 500 bp க்கு மேல் உள்ள நீண்ட துண்டுகளுக்கு மட்டுமே பயனுள்ளதாக இருக்கும், மேலும் குறுகிய துண்டுகளில் சிறிய விளைவைக் கொண்டிருக்கிறது.

புற ஊதா கதிர்வீச்சின் போது, ​​PCR தயாரிப்பில் உள்ள பைரிமிடின் தளங்கள் டைமர்களை உருவாக்கும்.இந்த டைமர்கள் நீட்டிப்பை நிறுத்தலாம், ஆனால் டிஎன்ஏ சங்கிலியில் உள்ள அனைத்து பைரிமிடைன்களும் டைமர்களை உருவாக்க முடியாது, மேலும் புற ஊதா கதிர்வீச்சும் டைமர்களை உடைக்கலாம்..டைமர் உருவாக்கத்தின் அளவு புற ஊதா அலைநீளம், பைரிமிடின் டைமரின் வகை மற்றும் டைமர் தளத்தை ஒட்டிய நியூக்ளியோடைடுகளின் வரிசை ஆகியவற்றைப் பொறுத்தது.எனவே, PCR பெருக்கப்பட்ட துண்டுகள் சிறியதாக இருந்தால், UNG எதிர்ப்பு PCR தயாரிப்பு மாசுபடுத்தும் முறையைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.

3:பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் டிஎன்ஏ மாசு துடைப்பான்கள்

news812 (3)

பைப்பெட்டுகள் சேர்க்கப்படும் போது ஏரோசோல்கள் எளிதில் உருவாக்கப்படுகின்றன, இது தவிர்க்க கடினமாக உள்ளது, மேலும் அது விரைவாக குடியேறும்.எனவே, டிஎன்ஏ மாசு பரவுவதைத் தடுக்க சிறப்பு டிஎன்ஏ மாசு துடைப்பான்களை அடிக்கடி பயன்படுத்துவது சந்தேகத்திற்கு இடமின்றி ஒரு நல்ல தேர்வாகும்.

4: UNG மாசு எதிர்ப்பு அமைப்பைப் பயன்படுத்தவும்

news812 (4)

PCR தயாரிப்பு மாசு நீக்கப்பட்ட பிறகு, சோதனை ஆய்வகம் PCR தயாரிப்பு மாசுபாட்டைத் தடுக்க UNG எதிர்ப்பு PCR தயாரிப்பு மாசுபடுத்தும் அமைப்பைப் பயன்படுத்தலாம்.பொது ஆய்வகங்களில், நீங்கள் எளிமையான சோதனைப் பகிர்வுகளைச் செய்யலாம், PCR தயாரிப்புப் பகுதியை மற்ற பகுதிகளிலிருந்து கண்டிப்பாகப் பிரிக்கலாம், சில ஆய்வக விதிகள் மற்றும் ஒழுங்குமுறைகளை நிறுவலாம் மற்றும் PCR தயாரிப்பு மாசுபடுவதைத் தடுக்க பொருத்தமான பயிற்சிகளை மேற்கொள்ளலாம்.

பரிந்துரைகள்: நியாயமான PCR ஆய்வகத்தை நிறுவுதல், ஒரு நல்ல PCR சூழலை பராமரித்தல், நிலையான PCR இயக்க நடைமுறைகளை உருவாக்குதல் மற்றும் பரிசோதனையாளர்களின் கடுமையான இயக்க விழிப்புணர்வை வளர்ப்பது ஆகியவை PCR சோதனைகளின் மாசுபாட்டைத் தடுக்க அல்லது குறைக்கும் திறவுகோலாகும்.


இடுகை நேரம்: ஆகஸ்ட்-12-2021