• முகநூல்
  • இணைக்கப்பட்ட
  • வலைஒளி

அறிமுகம்:

ஆர்என்ஏ, அறிவியல் பெயர் ரிபோநியூக்ளிக் அமிலம், அதன் சுருக்கமானது ரிபோநியூக்ளிக் அமிலத்திலிருந்து வந்தது, இது ஒரு வகை நியூக்ளிக் அமிலமாகும், இது பாஸ்போடிஸ்டர் பிணைப்புகள் மூலம் குறைந்தது டஜன் கணக்கான ரிபோநியூக்ளியோடைடுகளை இணைப்பதன் மூலம் உருவாகிறது.

ஆர்என்ஏவை ஆராய்வதன் அடிப்படையானது மாசு இல்லாத மொத்த ஆர்என்ஏவை பிரித்தெடுப்பதாகும், மேலும் ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தலின் அடிப்படைக் கொள்கையை தோராயமாக பின்வருமாறு சுருக்கமாகக் கூறலாம்

1. முதலில் செல்களை சீர்குலைக்கவும்

2. பின்னர் மேக்ரோமாலிகுலர் அசுத்தங்களை (புரதங்கள், லிப்பிடுகள், டிஎன்ஏ போன்றவை) அகற்றவும்.

3. இறுதியாக, உப்புகள் மற்றும் கரிம கரைப்பான்களை அகற்றும் போது, ​​ஆர்.என்.ஏ.வை மேலும் சுத்திகரிக்கும் போது ஆர்.என்.ஏ.

பிரித்தெடுத்தல் முறையின் கடந்த கால மற்றும் தற்போதைய

முதல் தலைமுறை ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுக்கும் முறை டிரிசோல் மழைப்பொழிவு முறை (குவானிடைன் ஐசோதியோசயனேட், பீனால், குளோரோஃபார்ம் போன்றவை பயன்படுத்தப்படுகிறது.) தாத்தா பியோட்டர் சோம்சின்ஸ்கி மற்றும் பாட்டி நிகோலெட்டா சாச்சி ஆகியோரால் கண்டுபிடிக்கப்பட்டது, ஏனெனில் இந்த கண்டுபிடிப்பு ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுக்கும் ஆராய்ச்சியை விரைவாகவும் எளிதாகவும் தொடங்க அனுமதிக்கிறது.

fjghj

பின்னர், தாத்தா இந்த காப்புரிமையை இன்விட்ரஜனுக்கு விற்றார், மேலும் இன்விட்ரஜன் இந்த முறையை உலகிற்கு விளம்பரப்படுத்தியது மற்றும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் முறையாக மாறியது.

பின்னர், இன்விட்ரஜனை தெர்மோ வாங்கியது!

பிரதிநிதி தயாரிப்பு: இன்விட்ரஜனின் TRIzol மறுஉருவாக்கம்

cjgh

இருப்பினும், TRIzol மழைப்பொழிவு முறைக்கு பன்மடங்கு மழைப்பொழிவு மற்றும் RNA பிரித்தெடுத்தல் தேவைப்படுகிறது, மேலும் பயன்படுத்தப்படும் எதிர்வினைகள் நச்சுத்தன்மையுடையவை மற்றும் செயல்பட நீண்ட நேரம் எடுக்கும்.

எனவே, இரண்டாம் தலைமுறை நெடுவரிசை-என்சைம் சுத்திகரிப்பு முறை உருவானது, சிலிக்கா ஜெல் சவ்வை ஒரு குறிப்பிட்ட நியூக்ளிக் அமிலம் உறிஞ்சும் பொருளாகப் பயன்படுத்தி, மற்ற அசுத்தங்களை அகற்றும் போது மாதிரியில் உள்ள ஆர்என்ஏவை மீட்டெடுக்கிறது.

இரண்டாம் தலைமுறை முறையானது, நிலையான செயல்திறனின் அடிப்படையில் செயல்பாட்டை எளிதாக்குகிறது, ஆபத்து காரணியைக் குறைக்கிறது மற்றும் ஆர்என்ஏ பிரித்தெடுத்தலின் செயல்திறனை மேம்படுத்துகிறது.

பிரதிநிதி தயாரிப்புகள்: QIAGEN RNeasy மற்றும் பெரும்பாலான உள்நாட்டு தயாரிப்புகள்

ghjfgh

இருப்பினும், முதல் மற்றும் இரண்டாம் தலைமுறை முறைகள் இரண்டும் டிஎன்ஏ மாசுபாட்டை அகற்றுவதற்கு டிநேஸைப் பயன்படுத்த வேண்டும், இது அடுத்தடுத்த கீழ்நிலை சோதனைகளுக்கு சில சிரமங்களைக் கொண்டுவருகிறது.எஞ்சிய DNase ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனின் செயல்திறனைக் குறைக்கும் மற்றும் முதல்-ஸ்ட்ராண்ட் சிடிஎன்ஏ தொகுப்பைக் குறைக்கும், இதன் மூலம் முடிவுகளின் துல்லியத்தை பாதிக்கும்.

எனவே, மூன்றாம் தலைமுறை பிரித்தெடுக்கும் முறை இரண்டாம் தலைமுறையின் அடிப்படையில் உகந்ததாக உள்ளது.சோதனையில் எந்த நொதிகளையும் சேர்க்க வேண்டிய அவசியமில்லை, மேலும் இரண்டு நெடுவரிசைகள் மூலம் ஆர்என்ஏவை எளிதாகப் பெறலாம்.

நெடுவரிசை 1: டிஎன்ஏவை அழிக்க டிஎன்ஏ-சுத்தப்படுத்தும் நெடுவரிசை

நெடுவரிசை 2: ஆர்என்ஏ-மட்டும் நெடுவரிசை குறிப்பாக ஆர்என்ஏவை உறிஞ்சி மீட்டெடுக்கிறது

அத்தகைய எளிய செயல்பாடு நேரத்தை மிச்சப்படுத்துவது மட்டுமல்லாமல், கீழ்நிலை சோதனைகளின் செயல்பாட்டை எளிதாக்குகிறது!

பிரதிநிதி தயாரிப்புகள்: QIAGEN RNeasy Plus மற்றும்முன்னோடிஆர்என்ஏ சுத்திகரிப்பு தொடர் தயாரிப்புகள்

cgjfgj

(RNeasy Plus)

vghjgh

(ஃபோர்ஜீனின்தாவர மொத்த RNA ஐசோலேஷன் கிட்)

அமைதியாகச் சொல்லுங்கள்!Foregene இன் RNA கிட், பயன்படுத்த எளிதான RNase Eraser ஐ வழங்குகிறது, இது மனித உடலில் எந்த நச்சுப் பொருட்களையும் சேர்க்காமல், திடமான மேற்பரப்பில் உள்ள 400μg RNase ஐ 1 நிமிடத்தில் முழுவதுமாக அகற்றும்!

படம்1: செயல்பாட்டு செயல்முறை ஒப்பீட்டு விளக்கப்படம்

cjcghj

Foregene இன் தயாரிப்புகள் இரண்டு பாடல்களில் RNA பிரித்தெடுத்தலை முடிக்க முடியும், உங்கள் சோதனை முன்னேற்றத்தைக் கண்டு மற்றவர்கள் பொறாமை கொள்ள வேண்டாம்!

படம்2:Eசோதனை முடிவுகள் ஒப்பீட்டு விளக்கப்படம்

முதல் தலைமுறை (1: TRIzol)

இரண்டாம் தலைமுறை (2: QIAGEN இன் RNeasy)

மூன்றாம் தலைமுறை (3: QIAGEN இன் RNeasy plus, 4: Foregene)

ghjghk

படம்3: qPCR வரைபடம் (பெருக்க வளைவு வரைபடம்)

முதல் தலைமுறை (பச்சை என்றால் TRIzol -, சிவப்பு என்றால் TRIzol +)

jhkgjhfg

இரண்டாம் தலைமுறை (வானம் நீலம் என்றால் QIAGEN RNeasy-, சிவப்பு என்றால் QIAGEN RNeasy +)

cjh1

மூன்றாம் தலைமுறை (நீலம் என்றால் QIAGEN RNeasy பிளஸ், பச்சை என்றால் Foregene)

fgjgy2

(குறிப்பு: qPCR வரைபடம் "-" என்பது DNase சேர்க்கப்படவில்லை மற்றும் DNA மாசுபடுதல் அகற்றப்படவில்லை என்பதைக் குறிக்கிறது. எனவே, CT அதிகமாக உள்ளது மற்றும் முடிவு துல்லியமாக இல்லை; "+" என்பது DNase சேர்க்கப்பட்டுள்ளது மற்றும் DNA மாசு நீக்கப்பட்டது, முடிவு துல்லியமானது)

ஒவ்வொரு தொழில்நுட்ப மேம்படுத்தலும் சோதனையின் செயல்பாடு எளிமையான மற்றும் பயனர் நட்பு திசையில் உருவாகிறது என்று அர்த்தம்.

Foregene மேலும் விஞ்ஞான ஆராய்ச்சியாளர்களுக்கு சோதனை நேரத்தையும் செலவையும் மிச்சப்படுத்தவும், உயர்தர சோதனை முடிவுகளைப் பெறவும், மேலும் மதிப்புமிக்க அறிவியல் ஆராய்ச்சி சாதனைகளை கூட்டாக உருவாக்கவும் உதவுவதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளது.


இடுகை நேரம்: ஜூலை-09-2021