ஆன்டிபாடிகள், இம்யூனோகுளோபுலின்ஸ் (Ig) என்றும் அழைக்கப்படுகின்றன, அவை குறிப்பாக ஆன்டிஜென்களுடன் பிணைக்கப்படும் கிளைகோபுரோட்டின்கள்.
 
வழக்கமான ஆன்டிபாடி தயாரிப்பு விலங்குகளுக்கு நோய்த்தடுப்பு மற்றும் ஆன்டிசெரம் சேகரிப்பதன் மூலம் தயாரிக்கப்படுகிறது.எனவே, ஆண்டிசெரம் பொதுவாக மற்ற தொடர்பற்ற ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் சீரத்தில் உள்ள பிற புரதக் கூறுகளுக்கு எதிரான ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டுள்ளது.பொது ஆன்டிஜென் மூலக்கூறுகள் பெரும்பாலும் பல வேறுபட்ட எபிடோப்களைக் கொண்டிருக்கின்றன, எனவே வழக்கமான ஆன்டிபாடிகள் பல வேறுபட்ட எபிடோப்புகளுக்கு எதிரான ஆன்டிபாடிகளின் கலவையாகும்.ஒரே எபிடோப்பிற்கு எதிராக இயக்கப்படும் வழக்கமான சீரம் ஆன்டிபாடிகள் கூட வெவ்வேறு பி செல் குளோன்களால் உற்பத்தி செய்யப்படும் பன்முக ஆன்டிபாடிகளால் ஆனவை.எனவே, வழக்கமான சீரம் ஆன்டிபாடிகள் பாலிக்குளோனல் ஆன்டிபாடிகள் அல்லது சுருக்கமாக பாலிக்குளோனல் ஆன்டிபாடிகள் என்றும் அழைக்கப்படுகின்றன.
 
மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி (மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி) என்பது ஒரு பி செல் குளோனால் உற்பத்தி செய்யப்படும் மிகவும் சீரான ஆன்டிபாடி மற்றும் ஒரு குறிப்பிட்ட எபிடோப்பிற்கு எதிராக மட்டுமே இயக்கப்படுகிறது.இது பொதுவாக ஹைப்ரிடோமா தொழில்நுட்பத்தால் தயாரிக்கப்படுகிறது-ஹைப்ரிடோமா ஆன்டிபாடி தொழில்நுட்பம் செல் இணைவு தொழில்நுட்பத்தை அடிப்படையாகக் கொண்டது, குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் மைலோமா செல்களை சுரக்கும் திறனுடன் B-செல் ஹைப்ரிடோமாக்களில் எல்லையற்ற வளர்ச்சி திறன் கொண்ட மைலோமா செல்களை இணைக்கிறது.இந்த ஹைப்ரிடோமா செல் ஒரு பெற்றோர் செல்லின் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளது.இது மைலோமா செல்கள் போன்ற விட்ரோவில் காலவரையின்றி மற்றும் அழியாமல் பெருகும், மேலும் இது மண்ணீரல் லிம்போசைட்டுகள் போன்ற குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளை ஒருங்கிணைத்து சுரக்கும்.குளோனிங் மூலம், ஒற்றை ஹைப்ரிடோமா கலத்திலிருந்து பெறப்பட்ட ஒரு மோனோக்ளோனல் கோடு, அதாவது ஹைப்ரிடோமா செல் லைன் பெறலாம்.அது உருவாக்கும் ஆன்டிபாடிகள், அதே ஆன்டிஜெனிக் தீர்மானிக்கு எதிராக, அதாவது மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளுக்கு எதிராக மிகவும் ஒரே மாதிரியான ஆன்டிபாடிகள் ஆகும்.
 
ஆன்டிபாடிகள் ஒன்று அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட Y- வடிவ மோனோமர்களாக உள்ளன (அதாவது, மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகள் அல்லது பாலிகுளோனல் ஆன்டிபாடிகள்).ஒவ்வொரு Y-வடிவ மோனோமரும் 4 பாலிபெப்டைட் சங்கிலிகளால் ஆனது, இதில் இரண்டு ஒத்த கனமான சங்கிலிகள் மற்றும் இரண்டு ஒத்த ஒளி சங்கிலிகள் உள்ளன.ஒளி சங்கிலி மற்றும் கனமான சங்கிலி ஆகியவை அவற்றின் மூலக்கூறு எடைக்கு ஏற்ப பெயரிடப்படுகின்றன.Y-வடிவ கட்டமைப்பின் மேல் பகுதி மாறி பகுதி, இது ஆன்டிஜென் பிணைப்பு தளமாகும்.(டெட்டாய் பயோ-மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி கான்செப்டில் இருந்து ஒரு பகுதி)
 
ஆன்டிபாடி அமைப்பு
கனமான சங்கிலி
α, δ, ε, γ மற்றும் μ என்ற கிரேக்க எழுத்துக்களுடன் பெயரிடப்பட்ட ஐந்து வகையான பாலூட்டிகளின் Ig கனரக சங்கிலிகள் உள்ளன.தொடர்புடைய ஆன்டிபாடிகள் IgA, IgD, IgE, IgG மற்றும் IgM என்று அழைக்கப்படுகின்றன.வெவ்வேறு கனமான சங்கிலிகள் அளவு மற்றும் கலவையில் வேறுபடுகின்றன.α மற்றும் γ தோராயமாக 450 அமினோ அமிலங்களைக் கொண்டுள்ளது, அதே சமயம் μ மற்றும் ε தோராயமாக 550 அமினோ அமிலங்களைக் கொண்டுள்ளது.
ஒவ்வொரு கனமான சங்கிலிக்கும் இரண்டு பகுதிகள் உள்ளன: நிலையான பகுதி மற்றும் மாறி மண்டலம்.ஒரே வகையின் அனைத்து ஆன்டிபாடிகளும் ஒரே நிலையான பகுதியைக் கொண்டுள்ளன, ஆனால் வெவ்வேறு வகையான ஆன்டிபாடிகளுக்கு இடையே வேறுபாடுகள் உள்ளன.γ, α, மற்றும் δ ஆகிய கனமான சங்கிலிகளின் நிலையான பகுதிகள் மூன்று Ig டொமைன்களை ஒன்றாக இணைத்து, அதன் நெகிழ்வுத்தன்மையை அதிகரிக்க ஒரு கீல் பகுதி கொண்டது;கனமான சங்கிலிகளின் நிலையான பகுதிகள் μ மற்றும் ε 4 Ig டொமைன்களால் ஆனது.வெவ்வேறு B செல்களால் உற்பத்தி செய்யப்படும் ஆன்டிபாடியின் கனமான சங்கிலியின் மாறி பகுதி வேறுபட்டது, ஆனால் அதே B செல் அல்லது செல் குளோன் மூலம் உற்பத்தி செய்யப்படும் ஆன்டிபாடியின் மாறி பகுதி ஒன்றுதான், மேலும் ஒவ்வொரு கனமான சங்கிலியின் மாறி பகுதியும் சுமார் 110 அமினோ அமிலங்கள் நீளம் கொண்டது., மேலும் ஒரு Ig டொமைனை உருவாக்கவும்.
 
ஒளி சங்கிலி
பாலூட்டிகளில் இரண்டு வகையான ஒளி சங்கிலிகள் மட்டுமே உள்ளன: லாம்ப்டா வகை மற்றும் கப்பா வகை.ஒவ்வொரு ஒளிச் சங்கிலியும் இரண்டு இணைக்கப்பட்ட டொமைன்களைக் கொண்டுள்ளது: ஒரு நிலையான பகுதி மற்றும் மாறக்கூடிய பகுதி.ஒளிச் சங்கிலியின் நீளம் சுமார் 211~217 அமினோ அமிலங்கள்.ஒவ்வொரு ஆன்டிபாடியிலும் உள்ள இரண்டு ஒளி சங்கிலிகள் எப்போதும் ஒரே மாதிரியாக இருக்கும்.பாலூட்டிகளுக்கு, ஒவ்வொரு ஆன்டிபாடியிலும் உள்ள ஒளிச் சங்கிலியில் ஒரே ஒரு வகை உள்ளது: கப்பா அல்லது லாம்ப்டா.குருத்தெலும்பு மீன்கள் (குருத்தெலும்பு மீன்கள்) மற்றும் எலும்பு மீன்கள் போன்ற சில கீழ் முதுகெலும்புகளில், அயோட்டா (ஐயோட்டா) வகை போன்ற பிற வகையான ஒளி சங்கிலிகளும் காணப்படுகின்றன.
 
Fab மற்றும் Fc பிரிவுகள்
Fc பிரிவை நேரடியாக என்சைம்கள் அல்லது ஃப்ளோரசன்ட் சாயங்களுடன் இணைந்து ஆன்டிபாடிகளை லேபிளிடலாம்.இது ELISA செயல்பாட்டின் போது தட்டில் ஆன்டிபாடி ரிவெட் செய்யும் பகுதியாகும், மேலும் இது இரண்டாவது ஆன்டிபாடி அங்கீகரிக்கப்பட்டு இம்யூனோபிரெசிபிட்டேஷன், இம்யூனோபிளாட்டிங் மற்றும் இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி ஆகியவற்றில் பிணைக்கப்படும் பகுதியாகும்.ஆன்டிபாடிகளை இரண்டு F(ab) பிரிவுகளாகவும், ஒரு Fc பிரிவாகவும் பப்பைன் போன்ற புரோட்டியோலிடிக் என்சைம்கள் மூலம் ஹைட்ரோலைஸ் செய்யலாம் அல்லது பெப்சின் மூலம் கீல் பகுதியில் இருந்து உடைத்து ஒரு F(ab)2 பிரிவு மற்றும் ஒரு Fc பிரிவாக ஹைட்ரோலைஸ் செய்யலாம்.IgG ஆன்டிபாடி துண்டுகள் சில நேரங்களில் மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும்.Fc பிரிவு இல்லாததால், F(ab) பிரிவு ஆன்டிஜெனுடன் வீழ்படியாது, அல்லது விவோ ஆய்வுகளில் நோயெதிர்ப்பு உயிரணுக்களால் பிடிக்கப்படாது.சிறிய மூலக்கூறு துண்டுகள் மற்றும் குறுக்கு-இணைப்பு செயல்பாடு இல்லாததால் (Fc பிரிவு இல்லாததால்), Fab பிரிவு பொதுவாக செயல்பாட்டு ஆய்வுகளில் ரேடியோலேபிளிங்கிற்குப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் Fc பிரிவு முக்கியமாக ஹிஸ்டோகெமிக்கல் கறைகளில் தடுக்கும் முகவராகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
 
மாறி மற்றும் நிலையான பகுதிகள்
மாறக்கூடிய பகுதி (V பகுதி) N-டெர்மினஸுக்கு அருகிலுள்ள H சங்கிலியின் 1/5 அல்லது 1/4 (சுமார் 118 அமினோ அமில எச்சங்கள் கொண்டது) மற்றும் L சங்கிலியின் N- முனையத்திற்கு அருகில் 1/2 (சுமார் 108-111 அமினோ அமில எச்சங்கள் கொண்டது) அமைந்துள்ளது.ஒவ்வொரு V பகுதியும் உள்-செயின் டைசல்பைட் பிணைப்புகளால் உருவாக்கப்பட்ட பெப்டைட் வளையத்தைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் ஒவ்வொரு பெப்டைட் வளையமும் தோராயமாக 67 முதல் 75 அமினோ அமில எச்சங்களைக் கொண்டுள்ளது.V பகுதியில் உள்ள அமினோ அமிலங்களின் கலவை மற்றும் அமைப்பு ஆன்டிபாடியின் ஆன்டிஜென் பிணைப்பு தனித்தன்மையை தீர்மானிக்கிறது.V பகுதியில் உள்ள அமினோ அமிலங்களின் எப்போதும் மாறிவரும் வகைகள் மற்றும் வரிசையின் காரணமாக, பல்வேறு பிணைப்பு ஆன்டிஜென் விவரக்குறிப்புகள் கொண்ட பல வகையான ஆன்டிபாடிகள் உருவாகலாம்.L சங்கிலி மற்றும் H சங்கிலியின் V பகுதிகள் முறையே VL மற்றும் VH என அழைக்கப்படுகின்றன.VL மற்றும் VH இல், சில உள்ளூர் பகுதிகளின் அமினோ அமில கலவை மற்றும் வரிசை ஆகியவை அதிக அளவு மாறுபாட்டைக் கொண்டுள்ளன.இந்த பகுதிகள் ஹைப்பர்வேரியபிள் பகுதிகள் (HVR) என்று அழைக்கப்படுகின்றன.V பகுதியில் உள்ள HVR அல்லாத பகுதிகளின் அமினோ அமில கலவை மற்றும் அமைப்பு ஒப்பீட்டளவில் பழமைவாதமானது, இது கட்டமைப்பின் பகுதி என்று அழைக்கப்படுகிறது.VL இல் மூன்று அதிவேகப் பகுதிகள் உள்ளன, அவை வழக்கமாக முறையே 24 முதல் 34 மற்றும் 89 முதல் 97 வரையிலான அமினோ அமில எச்சங்களில் அமைந்துள்ளன.VL மற்றும் VH இன் மூன்று HVRகள் முறையே HVR1, HVR2 மற்றும் HVR3 என அழைக்கப்படுகின்றன.எக்ஸ்ரே கிரிஸ்டல் டிஃப்ராஃப்ரக்ஷனின் ஆராய்ச்சி மற்றும் பகுப்பாய்வு, ஹைப்பர்வேரியபிள் பகுதி உண்மையில் ஆன்டிபாடி ஆன்டிஜென் பிணைக்கும் இடம் என்பதை நிரூபித்தது, எனவே இது நிரப்பு-தீர்மானப் பகுதி (சிடிஆர்) என்று அழைக்கப்படுகிறது.VL மற்றும் VH இன் HVR1, HVR2 மற்றும் HVR3 ஆகியவற்றை முறையே CDR1, CDR2 மற்றும் CDR3 என அழைக்கலாம்.பொதுவாக, CDR3 அதிக அளவு அதிவேகத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது.Ig மூலக்கூறுகளின் இடியோடிபிக் தீர்மானிப்பான்கள் இருக்கும் முக்கிய இடமாகவும் ஹைபர்வேரியபிள் பகுதி உள்ளது.பெரும்பாலான சந்தர்ப்பங்களில், ஆன்டிஜெனுடன் பிணைப்பதில் H சங்கிலி மிகவும் முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது.
நிலையான பகுதி (C பகுதி)C டெர்மினஸுக்கு அருகிலுள்ள H சங்கிலியின் 3/4 அல்லது 4/5 (தோராயமாக அமினோ அமிலம் 119 முதல் C முனையம் வரை) மற்றும் L சங்கிலியின் C முனையத்திற்கு அருகில் 1/2 (சுமார் 105 அமினோ அமில எச்சங்களைக் கொண்டுள்ளது).எச் சங்கிலியின் ஒவ்வொரு செயல்பாட்டுப் பகுதியும் சுமார் 110 அமினோ அமில எச்சங்களைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் டிஸல்பைடு பிணைப்புகளால் இணைக்கப்பட்ட 50-60 அமினோ அமில எச்சங்களைக் கொண்ட பெப்டைட் வளையத்தைக் கொண்டுள்ளது.இந்தப் பகுதியின் அமினோ அமிலக் கலவை மற்றும் அமைப்பு ஒரே விலங்கு Ig ஐசோடைப் L சங்கிலி மற்றும் அதே வகை H சங்கிலி ஆகியவற்றில் ஒப்பீட்டளவில் நிலையானது.அதே போல, இது தொடர்புடைய ஆன்டிஜெனுடன் மட்டுமே பிணைக்க முடியும், ஆனால் அதன் சி பகுதியின் அமைப்பு ஒன்றுதான், அதாவது, அதே ஆன்டிஜெனிசிட்டி உள்ளது.குதிரை மனித எதிர்ப்பு IgG இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடி (அல்லது ஆன்டிபாடி) வெவ்வேறு எக்ஸோடாக்சின்களுக்கு எதிராக இரண்டு A ஆன்டிபாடிகளின் (IgG) கலவையுடன் இணைக்கப்படலாம்.இது இரண்டாம் நிலை ஆன்டிபாடிகளைத் தயாரிப்பதற்கும், ஃப்ளோரசெசின், ஐசோடோப்புகள், என்சைம்கள் மற்றும் பிற லேபிளிடப்பட்ட ஆன்டிபாடிகளைப் பயன்படுத்துவதற்கும் முக்கியமான அடிப்படையாகும்.
 
 
தொடர்புடைய தயாரிப்புகள்:
செல் நேரடி RT-qPCR கிட்