மவுஸ் டெயில் டைரக்ட் பிசிஆர் கிட்-யுஎன்ஜி டைரக்ட் பிசிஆர் லைசிஸ் ரீஜென்ட்(மவுஸ் டெயில்)(மரபணு வகைக்கு)
விளக்கங்கள்
பிசிஆர் எதிர்வினைகளுக்கு மவுஸ் டெயில்கள், காதுகள், தசைகள் மற்றும் பிற திசு மாதிரிகளிலிருந்து மரபணு டிஎன்ஏவை விரைவாக வெளியிட இந்த கிட் ஒரு தனித்துவமான லிசிஸ் பஃபர் அமைப்பைப் பயன்படுத்துகிறது, எனவே இது பெரிய அளவிலான மரபணு சோதனைக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.
65 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 10-30 நிமிடங்களுக்குள் லைசிஸ் பஃப்பரிலிருந்து மரபணு டிஎன்ஏவை வெளியிடும் செயல்முறை முடிவடைகிறது.புரதம் மற்றும் ஆர்என்ஏ அகற்றுதல் போன்ற வேறு எந்த செயல்முறைகளும் தேவையில்லை, மேலும் வெளியிடப்பட்ட டிஎன்ஏவை PCR எதிர்வினைக்கான டெம்ப்ளேட்டாகப் பயன்படுத்தலாம்.
2× M1-PCR எளிதானதுTMMix (UNG) 2× M1-PCR Easy அடிப்படையில் dTTPக்குப் பதிலாக dUTP ஐப் பயன்படுத்துகிறதுTM கலக்கவும் (UNG), மற்றும் அதே நேரத்தில் dUTP உள்ள டெம்ப்ளேட்டை சிதைக்கக்கூடிய UNG என்சைம் (Uracil-N-glycosylase) சேர்க்கிறது.பிசிஆர் எதிர்வினைக்கு முன், யுரேசில் கொண்ட பிசிஆர் தயாரிப்பை சிதைக்க யுஎன்ஜி என்சைம் பயன்படுத்தப்படுகிறது.யுராசில் இல்லாத டெம்ப்ளேட்டில் யுஎன்ஜி என்சைம் எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தாது, இதன் மூலம் பெருக்கத்தின் தனித்தன்மை மற்றும் துல்லியத்தை உறுதிசெய்து பெரிய அளவிலான மரபணு சோதனையின் சாத்தியத்தைத் தடுக்கிறது.PCR தயாரிப்புகளின் மாசுபாடு ஏற்பட்டது.
டி-டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் என்பது டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ஆகும், இது ஃபோர்ஜீனால் நேரடியாக பிசிஆர் எதிர்வினைகளுக்காக சிறப்பாக உருவாக்கப்பட்டது.டி-டாக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் பல்வேறு பிசிஆர் எதிர்வினை தடுப்பான்களுக்கு வலுவான சகிப்புத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் பல்வேறு சிக்கலான எதிர்வினை அமைப்புகளில் டிஎன்ஏவின் சுவடு அளவுகளை திறம்பட பெருக்க முடியும், மேலும் பெருக்க வேகம் 2 கேபி/நிமிடத்தை எட்டும், இது நேரடி பிசிஆர் எதிர்வினைக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.
விவரக்குறிப்புகள்
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
கிட் கூறுகள்
பகுதி I | தாங்கல் எம்.பி |
Foregene Protease Plus | |
6× டிஎன்ஏ ஏற்றுதல் தாங்கல் | |
பகுதி II | 2× M1 PCR எளிதானதுTMகலவை (UNG) |
வழிமுறைகள் |
அம்சங்கள் மற்றும் நன்மைகள்
■நேரத்தை எடுத்துக்கொள்ளும் மற்றும் விலையுயர்ந்த டிஎன்ஏ சுத்திகரிப்பு தேவையில்லை.
■ மாதிரி தேவை சிறியது, 5mg மவுஸ் திசு அல்லது 2-5mm மவுஸ் டெயில் சோதனை செய்யலாம்.
■ அரைத்தல் மற்றும் நசுக்குதல் போன்ற சிறப்பு சிகிச்சைகள் தேவையில்லை, மேலும் அறுவை சிகிச்சை எளிமையானது.
■ உகந்த PCR அமைப்பு PCR ஐ அதிக விவரக்குறிப்பு மற்றும் PCR எதிர்வினை தடுப்பான்களுக்கு வலுவான சகிப்புத்தன்மையை உருவாக்குகிறது.
■ மாசு எதிர்ப்பு PCR அமைப்பு 2×M1-PCR எளிதானதுTMமிக்ஸ் (UNG), இது PCR தயாரிப்புகளால் ஏற்படும் மாசுபாட்டை திறம்பட நீக்குகிறது மற்றும் பெருக்கத்தின் தனித்தன்மை மற்றும் துல்லியத்தை உறுதி செய்கிறது.
கிட் அளவுருக்கள்
பயன்பாட்டின் நோக்கம்: சுட்டி வால், சுட்டி காது, தசை மற்றும் பிற திசுக்கள்.
மாதிரி சிதைவிலிருந்து வெளியான DNA: PCR டெம்ப்ளேட்டாக மட்டுமே பயன்படுத்தப்படுகிறது.
கிட் பின்வரும் நோக்கங்களுக்காகப் பயன்படுத்தப்படலாம்: டிரான்ஸ்ஜெனோசிஸை அடையாளம் காணுதல், விலங்குகளின் மரபணு வகை, முதலியன.
வேலை ஓட்டம்
சேமிப்பு மற்றும் அடுக்கு வாழ்க்கை
இந்த கிட்டின் பகுதி I 2-8℃ இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.
ரியாஜென்ட் பஃபர் AL உலர்ந்த நிலையில் 12 மாதங்களுக்கு சேமிக்கப்படும்;நீண்ட சேமிப்புக்காக 2-8℃ இல் சேமிக்கலாம்.
Reagent Foregene Protease ஒரு தனித்துவமான சூத்திரத்தைக் கொண்டுள்ளது.அதன் செயல்பாடு மற்றும் ஸ்திரத்தன்மையை உறுதிப்படுத்த, தயவுசெய்து அதை 4℃ 12 மாதங்களுக்கு சேமிக்கவும்.
ரீஜென்ட் 6×டிஎன்ஏ ஏற்றுதல் தாங்கல் நீண்ட நேரம் 4℃ அல்லது -20℃ இல் சேமிக்கப்படும்.
இந்த கிட்டின் பகுதி II -20℃ இல் சேமிக்கப்பட வேண்டும்.
Reagent 2×M1 PCR EasyTM Mix(UNG), அடிக்கடி பயன்படுத்தினால், குறுகிய கால சேமிப்பிற்காக 4℃ இல் சேமிக்கலாம் (10 நாட்களுக்குள் பயன்படுத்தவும்).