-
விலங்கு திசு நேரடி பி.சி.ஆர் கிட்-யு.என்.ஜி.
பி.சி.ஆர் எதிர்விளைவுகளுக்கான விலங்கு திசு மாதிரிகளிலிருந்து மரபணு டி.என்.ஏவை விரைவாக வெளியிட இந்த கிட் ஒரு தனித்துவமான லிசிஸ் பஃபர் முறையைப் பயன்படுத்துகிறது, எனவே இது பெரிய அளவிலான மரபணு சோதனைக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.
லிசிஸ் பஃப்பரிலிருந்து மரபணு டி.என்.ஏவை வெளியிடும் செயல்முறை 10-30 நிமிடங்களுக்குள் 65 மணிக்கு முடிக்கப்படுகிறது°சி. புரதம் மற்றும் ஆர்.என்.ஏ அகற்றுதல் போன்ற வேறு எந்த செயல்முறைகளும் தேவையில்லை, மேலும் வெளியிடப்பட்ட சுவடு டி.என்.ஏவை பி.சி.ஆர் எதிர்வினைக்கான வார்ப்புருவாகப் பயன்படுத்தலாம்.
2×பி.சி.ஆர் ஈஸிடி.எம் மிக்ஸ் (யுஎன்ஜி) 2 அடிப்படையில் டிடிடிபிக்கு பதிலாக டி.யு.டி.பி பயன்படுத்துகிறது×பி.சி.ஆர் ஈஸிடி.எம் ஒரே நேரத்தில் dUTP கொண்ட வார்ப்புருவை சிதைக்கக்கூடிய UNG என்சைம் (யுரேசில்-என்-கிளைகோசைலேஸ்) கலந்து, சேர்க்கிறது. பி.சி.ஆர் எதிர்வினைக்கு முன், யுரேசில் கொண்ட பி.சி.ஆர் தயாரிப்பை சிதைக்க யு.என்.ஜி என்சைம் பயன்படுத்தப்படுகிறது. யுரேசில் இல்லாத வார்ப்புருவில் யு.என்.ஜி நொதி எந்த விளைவையும் ஏற்படுத்தாது, இதன் மூலம் பெருக்கத்தின் தனித்தன்மையையும் துல்லியத்தையும் உறுதிசெய்கிறது மற்றும் பெரிய அளவிலான மரபணு பரிசோதனையின் போது பி.சி.ஆர் தயாரிப்புகள் மாசுபடுவதற்கான வாய்ப்பைத் தடுக்கிறது.
டி-தாக் டி.என்.ஏ பாலிமரேஸ் என்பது டி.என்.ஏ பாலிமரேஸ் ஆகும், இது நேரடி பி.சி.ஆர் எதிர்வினைகளுக்காக ஃபோர்ஜீனால் சிறப்பாக உருவாக்கப்பட்டது. டி-தாக் டி.என்.ஏ பாலிமரேஸ் பலவிதமான பி.சி.ஆர் எதிர்வினை தடுப்பான்களுக்கு வலுவான சகிப்புத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் பல்வேறு சிக்கலான எதிர்வினை அமைப்புகளில் டி.என்.ஏவின் சுவடு அளவை திறமையாக பெருக்க முடியும், மேலும் பெருக்க வேகம் 2Kb / min ஐ அடையலாம், இது நேரடி பி.சி.ஆர் எதிர்வினைக்கு மிகவும் பொருத்தமானது.
